Иммуногистохимия

Суть

Иммуногистохимия (иначе ее называют иммуногистохимический анализ) представляет собой исследование, цель которого состоит в обнаружении патогенных клеток в тканевых образцах. Для этой цель используют молекулы, вырабатываемые иммунной системой.

Само название действия тройственное, в него уместились слова, которые сами по себе являются названиями определенных направлений в науке и практике:

• Иммунология;
• Гистология;
• Химия.

ИГХ – исследование дополнительное с точки зрения диагностики. К нему прибегают в случае отсутствия результатов гистологии, а также для уточнения на уровне молекул характеристик опухоли.

ИГХ имеет практическое применение при:

• Характеристике клеток;
• Анализе внутриклеточных процессов и уникальности синтеза, в клетках происходящего;
• Анализе гормонов и их рецепторов.

Исторический экскурс

Теоретические основы ИГХ-изучения были оформлены сороковые годы XX столетия Альбертом Кунсом. Применяя флуоресценцию, он искал патогенные клетки в замороженных. Позже пришла идея использовать молекулы, вырабатываемые иммунной системой, окрашивать их ферментами. Так было установлено соответствие реакции света и характеристики частиц онкологических.

В середине восьмидесятых аргентинец С.Мильштейн получил Нобелевскую премию за создание гибрида онкологической клетки с лимфоцитом, способной синтезировать моноклональные cellula.

В середине 1990-х гг. С.Тэйлор проверил двадцать тысяч злокачественных образований и установил, что в очень многих случаях поставленный диагноз был ошибочен. Именно тогда ИГХ показала свою эффективность в плане диагностическом.

Зачем проводить после гистологии?

Медицинская практика знает случаи, когда к ИГХ прибегают после гистологического исследования. Это объясняется рядом причин, одна из которых следующая: окончательный диагноз поставить нельзя, вследствие того, что у ракового образования микроскопическое строение очень неспецифичное.

Задачи ИГХ в борьбе с раком

В онкологии методика играет весьма важную роль, которую, конечно же недооценивать нельзя. Благодаря ИГХ, врач может:

• Отнести рак к определенному типу;
• Определить, какие белки провоцируют развитие опухолевых очагов;
• Обнаружить метастазы;
• Понять, имела ли место трансформация на уровне клеток;
• Сделать прогноз;
• Решить вопрос необходимости таргетной терапии;
• Выяснить, насколько чувствительны патогенные микрообразования к терапевтическому лечению.

Мазок на онкоцитологию

Виды

Выделяют два метода ИГХ-изучения – прямой и непрямой.

При прямом нужен один вид молекул-антител. Молекулы эти взаимодействуют с молекулой, которая является мишенью. Если эта патогенная частица присутствует в ткани и есть реакция, опухолевая ткань окрашивается.

Чаще применяют непрямой вид. Здесь необходимы две cellula. Первая начинает взаимодействовать с частицей атипичной, вторая вступает во взаимодействие с полученным комплексом «атипичная cellula – антитело». Маркер, который изменил свой цвет, связывают со второй частицей.

У непрямого ИГХ-изучения есть неоспоримое преимущество – чувствительность его более выше.

Еще одно преимущество в том, что для проведения диагностики по второму виду, нужно ограниченное количество молекулярного материала.

Этапы

Можно выделить несколько этапов подготовки к проведению ИГХ-изучения.

1. Проведение биопсии.
2. Биоптат фиксируют и помещают в парафин, который сохраняет структуру ткани;
3. Делают тончайшие срезы.
4. Срезы раскладывают на клейкое стекло;
5. Удаляют парафин.
6. Проводят анализ, используя микроскоп.

Перспективы

Перспективы, ИГХ, можно объединить в две группы:

• Обнаружение патологии;
• Лекарственная чувствительность.

Диагностические цели таковы:

• Окончательный вариант диагностического анализа;
• Уточнение степени раковой опухоли;
• Дифференцирование образований и процессов, с опухолями не связанными;
• Различение опухолевых процессов, присутствующих в организме.

Некоторые возможности с точки зрения препаратной чувствительности:

• Рецепторы стероидных гормонов;
• Белок Her2/neu;
• Рецепторы соматостатина 2А и 5 типов;
• PD-L1;
• Индекс пролиферативной активности (Ki-67);
• ALK, некоторые иные.

Мишени

Мишени – это опухолевые маркеры, и их достаточно много. Именно поэтому перед началом проведения процедуры врач четко должен понять предмет поиска.

Маркеров нет в здоровых микрообразованиях либо, а, если они есть, их количество довольно незначительно. Назовем несколько примеров:

• Альфа-фетопротеин;
• Цитокератины;
• Фермент CD10 (CALLA), некоторые иные.

Плюсы

У методики следующие плюсы:

• Минимальное количество биоптата и реактивов;
• Быстрый результат;
• Определение рака на начальной стадии его развития;
• Точность и достоверность;
• Возможность получения трехмерной картинки.

Ответ на взаимодействие с клеткой, выработанной иммунной системой, проявляется уже через три часа. Через неделю готовится окончательное заключение, в котором установлены:

• Тип онкологии;
• Стадия;
• Первичный очаг.

Погрешность минимальна, но она также может возникнуть, если пациент не придерживался рекомендаций по подготовке к процедуре.

Сроки выполнения

Сроки выполнения ИГХ-изучения определены Приказом Минздрава России №179н от 24.03.2016 г.:

• С использованием до 5 маркеров включительно – не более 7 рабочих дней;
• С использованием более 5 маркеров – не более 15 рабочих дней.

Роль в современной онкологии

ИГХ дает возможность досконально изучить все аспекты злокачественных опухолей, чего нельзя сказать о других диагностических способах.

Роль ее в уточнении прогнозов и назначении правильного лечения трудно переоценить.