Возможности хлореллы как пищевой добавки для укрепления здоровья человека

Аннотация: Хлорелла - зеленая одноклеточная водоросль, которая доступна во многих уголках мира в качестве пищевой добавки. Продукты с хлореллой содержат множество питательный элементов и витаминов, в том числе витамины D и В₁₂, которых нет в других продуктах растительного происхождения. Хлорелла содержит больше фолиевой кислоты и железа, чем другие растительные продукты. На млекопитающих, в том числе и на человека, дополнительный прием хлореллы оказывает положительное влияние. Ей присущи иммуномодулирующие, антиоксидантные, антидиабетические, антигипертензивные и антигиперлипидемические свойства. Метаанализ действия добавок хлореллы на факторы риска сердечно-сосудистых заболеваний предполагает, что они нормализуют уровень общего холестерина, снижают уровень липопротеинов низкой плотности, артериальное давление (систолическое и диастолическое), а также уровень глюкозы в крови натощак. Однако добавки никак не влияют на триглицериды и липопротеины высокой плотности. Эти полезные свойства хлореллы могут быть связаны с синергетическим действием ряда нутриентов и антиоксидантных соединений. Однако информации, касающейся биоактивных компонентов хлореллы пока недостаточно.

Ключевые слова: антиоксиданты; хлорелла; пищевые волокна; пищевые добавки; фолиевая кислота; лютеин; витамин В₁₂; витамина D₂

Введение

Микроводоросли обычно присутствуют в водных экосистемах, как в соленой, так и в пресной воде. Они представляют собой фотосинтезирующие эукариотические организмы, содержащие хлоропласты и ядра, подобные растениям. Микроводоросли более эффективно производят биомассу, чем наземные растения, что связано с более интенсивным использованием солнечного света и CO₂. Это приводит к очень высокому темпу роста [1]. По этой причине микроводоросли используются в качестве продукта питания, а также в фармакологических и косметических целях. Их пигменты, питательные вещества, биоактивные соединения и биомасса применяются по всему миру. Недавно в пресных и морских водорослях, в том числе в цианобактериях, были обнаружены несколько биоактивных соединений и нутриентов. Эти вещества, по мнению ученых, могут положительно влиять на здоровье человека [1,2]. Однако информации о биоактивных соединениях пресноводных видов хлореллы пока довольно мало.

Виды хлореллы можно культивировать массово, а их пищевые добавки коммерчески доступны по всему миру. Однако коммерческая культивация их биомассы началась лишь несколько лет назад. Chlorella vulgaris была обнаружена в 1890 году доктором Мартином Виллемом Бейеринком, знаменитым микробиологом и ботаником [3]. Другой вид хлореллы, отличающийся наличием пиреноидов в хлоропластах, был идентифицирован в 1903 году и соответственно назван C. pyrenoidosa [4]. С тех пор было охарактеризовано более 20 различных видов хлореллы и описано более 100 штаммов [5]. В настоящее время хлорелла включает в себя три разновидности: C. vulgaris, C. Lobophora и C. sorokiniana [6].

1. sorokiniana - подвид, который были впервые выделен в 1953 Сорокиным и изначально считался термоустойчивым мутантом C. pyrenoidosa [7,8]. C. pyrenoidosa, объект многих научных исследований, сейчас называется C. sorokiniana.

Первые исследования пищевой ценности хлореллы для здоровья человека появились в начале 1950-х годов, когда на фоне мирового пищевого кризиса началось использование хлореллы как продукта питания. Изначально хлореллу стали применять в Азии, преимущественно в Японии, позднее популярность пищевых добавок распространилась и в другие страны. В коммерческом производстве хлорелла используется в качестве продукта питания и как источник отдельных ее компонентов. Технологии масштабной культивации позволяют получать C. vulgaris и C. pyrenoidosa в количестве, достаточном для производства пищевых добавок [11]. Исследования показали, что клетки хлореллы содержат ряд питательных веществ и биоактивных соединений, которые улучшают состояние здоровья и предотвращают развитие некоторых заболеваний [10,12]. Это позволяет предположить, что натуральные компоненты, полученные из хлореллы, могут быть использованы в производстве синтетических соединений и препаратов. Содержание натуральных компонентов в хлорелле может значительно отличаться в зависимости от вида и условий обитания [13,14].

Здесь мы представили информацию о питательности хлореллы и содержании биоактивных соединений, полезных для здоровья человека. Однако в настоящее время информации, касающейся биоактивных соединений водоросли, немного. При этом их фармакологическое действие может быть связано с синергетическим эффектом различных нутриентов и антиоксидантных соединений.

2. Питательные вещества в коммерческих продуктах хлореллы

• Макроэлементы

Содержание макроэлементов в 13 коммерчески доступных продуктах хлореллы на основе информации представленной на упаковке, изложено в Таблице 1. Человек не может усвоить клетки хлореллы в естественном состоянии, потому что их стенки состоят из целлюлозы. По этой причине при производстве пищевых добавок стенки клеток водоросли механически повреждают. Исследование на животных показало, что усвоению подлежит более 80% белков хлореллы [15].

Таблица 1. Питательность 13 коммерчески доступных продуктов хлореллы.

*1 Стенки клеток разрушены; *2 Усвояемость белков; *3 Содержит экстракт хлореллы; *4 C. pyrenoidosa.

Эти продукты с хлореллой содержат большое количество белка (около 59% от сухого веса), что совпадает с аналитическими данными по содержанию белка в C. pyrenoidosa (57%) [16] и

2. vulgaris (51–58%) [17]. Протеина в водоросли больше, чес в соевых бобах (приблизительно 33% сухого веса). Содержание аминокислот в продуктах хлореллы С и М представлено в Таблице 2. Эти профили доказывают, что все незаменимые для человека аминокислоты (изолейцин, лейцин, лизин, метионин, фенилаланин, треонин, триптофан, валин и гистидин) присутствуют в продуктах в значительном количестве. Согласно индексу незаменимых аминокислот (ИНАК), используемому для оценки качества белка для питания человека, качество C. pyrenoidosa (ИНАК, 1,35) [18] и коммерчески доступного продукта хлореллы (ИНАК, 0,92) [19] выше, чем соевого белка (ИНАК, 0,66) [18]. Эти результаты указывают на то, что белок в составе добавок хлореллы очень высокого качества. Что интересно, продукты с хлореллой содержат значительное количество аргинина (приблизительно 3 200 мг/100 г сухого веса), который служит в качестве субстрата для производства NO, мощной внутриклеточной сигнальной молекулы, которая влияет на работу всех систем млекопитающих [20]. Аргинин также является эффективным модулятором иммунных функций [21].

Таблица 2. Содержание аминокислот в коммерчески доступных продуктам хлореллы С и М.

В коммерчески доступных продуктах хлореллы присутствует приблизительно 17% (сухой вес) углеводов. Схожие результаты были получены при изучении C. vulgaris [17]. Как показано в Таблице 1, более 65% углеводов представляют собой пищевые волокна, полученные из стенок хлореллы. Также получены и охарактеризованы различные полисахариды [22–25]. Полисахариды хлореллы - это ряд биологически активных соединений, в том числе антиоксиданты [24] и стимуляторы роста растения [25]. Табарса и др. [26] охарактеризовали водорастворимый α-глюкан, полученный из C. vulgaris. и укрепляющий иммунитет.

Коммерчески доступные продукты с хлореллой содержат небольшое количество жиров (около 11% от сухого веса) (Таблица 1), что совпадает с аналитическими данными по содержанию жира в C. vulgaris (14–22%) [17]. Добавки с хлореллой содержат α-линоленовую кислоту (приблизительно 10%-16% жирных кислот) и линолевую кислоту (приблизительно 18% жирных кислот), однако в них нет эйкозапентаеновой, докозагексеновой и арахидоновой кислот [19,27]. Около 65%-70% от общего содержания жирных кислот в коммерчески доступных продуктах хлореллы получены из полиненасыщенных жирных кислот [19,27].

Различные условия обитания, в том числе температура, питательный состав и количество света, влияют на уровень биомассы, наличие макро- и микроэлементов и других ценных биоактивных соединений, в том числе антиоксидантов, в клетках хлореллы [28–30].

• Микроэлементы

• Витамины

Как представлено в Таблице 3, коммерчески доступные продукты хлореллы содержат все необходимые для человека витамины, а именно B₁, B₂, B₆, B₁₂, ниацин, фолиевую кислоту, биотин, пантотеновую кислоту, C, D₂, E и K, а также α- и β-каротины. Добавки с хлореллой содержат значительное количество витаминов D₂ и B₁₂, которые, как известно, не встречаются в растениях. В коммерчески доступных продуктах хлореллы (C. vulgaris) присутствует больше фолиевой кислоты (приблизительно 2,5 мг/100 г сухого веса), чем в шпинате[31]. Дефицит витамина B₁₂ и фолиевой кислоты приводит к накапливанию гомоцистеина в сыворотке, что способствует развитию сердечно-сосудистых заболеваний. В этом разделе мы поговорим о витамине D₂, витамине B₁₂ и фолиевой кислоте.

Таблица 3. Содержание витаминов и родственных соединений в 13 коммерчески доступных продуктах хлореллы.

*1 Витамин K₁ (мг), *2 β-каротин (мг), *3 α-каротин + β-каротин (мг).

Витамина D, главный регулятор усвоения кальция, снижает риск остеомаляции у взрослых и рахита у детей [32]. Две основные пищевые формы витамина D, витамины D₂ и D₃, присутствуют соответственно в грибах [33,34] и продуктах животного происхождения, например, рыбе [35]. Грибы способны синтезировать эргостерол (провитамин D₂), который под воздействием ультрафиолета превращается в эргокальциферол в форме витамина D₂ [34,36]. Таким образом, грибы, подверженные ультрафиолетовому излучению, подходят в качестве источника витамина D₂ для строгих вегетарианцев [36]. Стенки клеток грибов содержат высокую концентрацию эргостерола, который играет важную физиологическую роль в модуляции прочной клеточной мембраны, подобно холестерину у животных [37]. Высушенные на солнце грибы содержат приблизительно 17 мкг витамина D₂ на 1 г сухого веса [38]. Биодоступность витамина D₂ из грибов была изучена с ходе исследований с участием добровольцев [39,40].

Сперва, в начале 1950-х годов эргостерол считался основным стерольным компонентом C. pyrenoidosa [41]. C. vulgaris также содержит значительное количество эргостерола [42,43]. Наши неопубликованные данные показывают, что один коммерчески доступный продукт хлореллы содержит как эргостерол (1,68 мг/г сухого веса), так и витамин D₂ (15,2 мкг/г сухого веса), что приблизительно соответствует их концентрации в сухих грибах. Витамин D₂ в этой пищевой добавке синтезируется из эргостерола под воздействием солнечного света во время культивации (Рисунок 1). Хотя ученые полагают, что витамин D₃ более эффективен в повышении концентрации циркулирующего 25-гидроксивитамина D [44], чем витамин D₂, продукты хлореллы и высушенные на солнце грибы могут стать источниками витамина D для вегетарианцев.

Сывороточный гомоцистеин (Hcy) является установленным биомаркером сердечно-сосудистых заболеваний у человека[45,46]. Hcy представляет собой аминокислоту, не образующую белок (Рисунок 2), формирующийся как промежуточное соединение метаболизма метионина и далее метаболизируется в цистатионин с помощью цистатионин-β-синтетазы, фермента, зависимого от витамина B₆ [46]. В противном случае Hcy может быть реметилирован обратно в метионин с помощью метионинсинтазы, фермента, зависимого от витамина В₁₂. Фолиевая кислота также необходима для реметилирования Hcy с образованием 5-метилтетрагидрофолата. Дефицит витамина B₁₂ [47], витамина B₆ [48] и фолиевой кислоты [49] вызывает гипергомоцистеинемию. В нескольких клинических исследованиях была отмечена взаимосвязь между атеросклерозом и дефицитом витамина B₁₂ и фолиевой кислоты [50,51]. Дефицит фолиевой кислоты у женщин до и во время беременности связан с дефектами нервной трубки у новорожденных[52]. Растения могут синтезировать фолиевые соединения de novo, а животные – нет [53]. Таким образом, продукты растительного происхождения являются источниками пищевых фолатов для человека. Сообщается о высоких концентрациях фолиевой кислоты (приблизительно 1,69–2,45 мг/100 г сухого веса) в коммерчески доступных продуктах хлореллы (C. vulgaris) [31], аналогичных концентрациям продуктов, показанных в Таблице 3 (0,3–3,6 мг/100 г сухого веса). Основными соединениями фолиевой кислоты, обнаруженными в продуктах хлореллы являются 5-CHO-H₄-фолат(60–62%) и 5-CH₃-H₄-фолат (24–26%), а второстепенными соединениями являются 10-CHO-фолат (5–7%), H₄-фолат (4%) и полностью окисленный фолат (3–6%) [31]. Химическая структура соединений фолиевой килсоты хлореллы показана на Рисунке 3. Основными пищевыми источниками фолиевой кислоты являются овощи (25%), хлеб и зерновые продукты (22%), молочные продукты (10%), фрукты (10%), масла и жиры (5%) [31]. Шпинат содержит достаточно большое количество этого соединения (165 мкг/100 г сырого веса; 1,7 мг/100 г сухого веса) [31,54], аналогично продуктам хлореллы. Таким образом, добавки с хлореллой являются отличным источником фолиевой кислоты для человека.

Витамин B₁₂ (B₁₂) синтезируется некоторыми бактериями и археями, но не растениями [55]. Продукты животного происхождения, например, мясо или моллюски, являются основными пищевыми источниками B₁₂ для человека [56]. Много B₁₂ содержится в говяжьей, свиной и куриной печени (приблизительно 25-53 мкг/100 г свежего продукта) [56] и в съедобных двустворчатых моллюсках (приблизительно 60 мкг/100 г свежего продукта) [57]. Концентрация витамина B₁₂ в продуктах хлореллы варьируется от <0,1 до 400 мкг на 100 г сухого веса [58,59], что показано в Таблице 3 (6–500 мкг/100 г сухого веса). Среди видов хлореллы содержание B₁₂ при выращивании в открытых условиях намного выше в C. pyrenoidosa, чем в C. Vulgaris [59]. Хлорелла вполне может обойтись без витамина B₁₂ [59,60]. Это позволяет предположить, что водоросль поглощает и накапливает большое количество экзогенного B₁₂. Некоторые продукты с хлореллой, богатые B₁₂, содержат неактивные соединения корриноидов, такие как 5-метоксибензимидазолилкобамид и корриноиды, не содержащие кобальта (Рисунок 4). Таким образом, добавки с хлореллой, содержащие большое количество B₁₂, являются одним из немногих источников B₁₂. Для точной оценки требуется идентификация соединений B₁₂ с использованием жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией [59].

Раума и др. [61] показали, что потребление пищевых добавок с хлореллой в значительной количестве позволит восполнить необходимость в витамине B₁₂. Другое исследование с участием строгих вегетарианцев (веганов) с повышенным уровнем метилмалоновой кислоты в сыворотке крови (как маркер дефицита B₁₂) показало, что потребление 9 граммов C. pyrenoidosa ежедневно в течение 60 дней привело к значительному снижение метилмалоновой кислоты в сыворотке у 88% участников [62]. Сывороточный Hcy снизился, а количество B₁₂ в целом выросло, однако средний объем эритроцитов, уровни гемоглобина и гематокрита не изменились. Эти результаты показывают, что продукты хлореллы с высоким содержанием B₁₂ и не содержащие неактивные соединения корриноиды, подходят в качестве источника B₁₂ для человека, в частности веганов.

• Минералы

Как представлено в Таблице 4, коммерчески доступные продукты хлореллы содержат ряд минералов, необходимых для здоровья человека. Так, пищевые добавки с хлореллой содержат значительное количество железа (104 мг/100 г сухого веса) и калия (986 мг/100 г сухого веса), которые, при достаточном приеме, предотвращают развитие анемии [63] и гипертонии [63] соответственно. Железо играет физиологическую роль в дыхании, производстве энергии, синтезе ДНК и пролиферации клеток [65] Фитаты в злаках могут замедлить всасываемость железа в кишечнике, так как они хелатируют железо, образуя нерастворимый комплекс[66]. Таким образом, веганы и вегетарианцы могут находится в группе риска развития железодефицитной анемии [63]. Исследования с участием крыс и добровольцев изучили способность добавок с хлореллой предотвращать железодефицитную анемию[67], [68]. В когорте из 32 женщин, находящихся на втором и третьем триместрах беременности, пероральный прием хлореллы (6 г в сутки) в течение 12-18 недель снизил маркеры анемии по сравнению с контрольной группой [68]. Результат позволяет предположить, что пищевые добавки с хлореллой значительно снижают риск анемии, связанной с беременностью.

Таблица 4. Содержание минералов в 13 коммерчески доступных продуктах хлореллы.

Селен (Se) - важный минерал, который является фундаментальным для здоровья человека. Это компонент селенопротеинов, таких как тиоредоксинредуктаза и глутатионпероксидаза, который также защищает от межклеточного окислительного повреждения [69-71]. Поэтому низкий уровень Se демонстрирует ряд фармакологических действий, в том числе противоопухолевые и антивозрастные эффекты; а повышенный уровень Se вызывает образование активных форм кислорода. В целом, органические формы селена более биодоступны и менее токсичны, чем его неорганические формы. Селениты SeO₃2− и SeO₄2− являются преобладающими формами Se в пресной воде. Микроводоросли являются основными переносчиками селена из пресной воды к фильтраторам и другим организмам. Хотя большинство видов растений накапливают мене 25 мкг селена на 1 грамм сухого веса [72], некоторые разновидности микроводорослей способны аккумулировать Se в высокой концентрации (100 мкг Se/1 г сухого веса) [73]. Se необходим многим водорослям для защиты от окислительного повреждения. Сун и др. [74] подчеркивают, что C. vulgaris может накапливать Se в большом количестве (857 мкг/г сухого веса) при выращивании в среде с концентрациями Se 0–200 мг/л, а относительно низкие концентрации Se (в среднем 75 мг селенита/л) положительно способствуют росту C. vulgaris и действуют как антиоксидант, ингибируя перекисное окисление липидов и внутриклеточные активные формы кислорода. Максимальное количество накопленного органического селена было обнаружено при 316 мкг/г сухого веса в условиях относительно низкого содержания селена (в среднем 75 мг селенита/л среды) [75], что указывает на то, что C. vulgari является эффективным накопителем селена, а обогащенные селеном клетки хлореллы могут быть добавкой, полезной для человека.

• Пигменты

Каротиноиды являются вторичными метаболитами наиболее распространенных природных пигментов, которые участвуют в различных биологических процессах растений, включая фотосинтез, фотоморфогенез, фотозащиту и развитие [76]. Они также служат красителями и являются важной частью рациона человека, как, например, антиоксиданты и провитамин А [76]. В живых организмах идентифицировано более 400 каротиноидов [77], среди которых широко известные β-каротин, астаксантин, лютеин, зеаксантин и ликопин. Зеленые микроводоросли Dunaliella salina продуцируют большое количество β-каротина, достигающее 14% от сухой массы водоросли [78]. В условиях повышенного стресса Haematococcus pluvialis увеличивает концентрацию астаксантина до 4–5% от сухой массы водоросли [79]. Продукты хлореллы содержат меньше каротиноидов (около 1,3%) [80] по сравнению с вышеупомянутыми зелеными водорослями. Сообщается, что в качестве основного каротиноида C. vulgaris производит лютеин [81,82]. Однако C. zofiniensis, по мнению ученых, накапливает значительное количество астаксантина и может быть подходящим организмом для массового производства астаксантина [83].

2. Фармакологическое действие продуктов с хлореллой

Так как клетки хлореллы содержат различные питательные вещества и биологически активные соединения, роль пищевых добавок с хлореллой в предотвращении развития различных заболеваний была изучена на крысах и мышах, в том числе на моделях животных с конкретными заболеваниями. Эти исследования оказались полезными для определения специфического воздействие добавок с хлореллой на состояние здоровья. Более того, влияние препаратов на смягчение признаков ряда заболеваний было изучено на людях. В ходе этих исследований был использован C. vulgaris или С. Pyrenoidosa, так как эти разновидности являются коммерчески доступными видами хлореллы в пищевых добавках.

• Антигипертензивное действие

Гипертензия повышает риск сердечно-сосудистых заболеваний [84]. Антигипертензивные соединения в пищевых продуктах были идентифицированы с использованием модели крыс со спонтанной гипертензией, склонные к инсульту (SHRSP). Они генетически предрасположенS к гипертонии и церебральному инсульту [85]. Сансава и др. [86] изучили влияние порошка хлореллы (C.regularis) на кровяное давление, повреждения в результате церебрального инсульта и продолжительность жизни SHRSP-крыс. У SHRSP-крыс возрастом 12 недель, которых кормили хлореллой (5%, 10% и 20%) в течение 13 недель, повышенное кровяное давление значительно снизилось в группах, получавших 10% и 20% хлореллы, по сравнению с контрольными группами, не получавшими препарат. Уровни общего холестерина в сыворотке были значительно ниже во всех группах с хлореллой, а средняя продолжительность жизни грызунов была больше, чем у контрольной группы. Чтобы охарактеризовать антигипертензивные соединения в хлорелле, порошок хлореллы был фракционирован на водорастворимую, жирорастворимую и остаточную фракции. Артериальное давление было значительно ниже у крыс, получавших жирорастворимую или остаточную фракцию, но не у крыс, получавших фракцию, растворимую в горячей воде. Жирорастворимая фракция содержала значительное количество каротиноидов, которые являются мощными антиоксидантами, и фосфолипидов, которые опосредуют метаболизм коллагена и эластина в аорте. Остаточная фракция содержала большое количество аргинина, который увеличивает производство релаксирующего фактора эндотелиального происхождения. Это положительное влияние порошка хлореллы на SHRSP-крыс может быть результатом синергетического воздействия многочисленных биологически активных соединений.

Чтобы понять, способны ли пищевые добавки с хлореллой снижать кровяное давление у объектов с незначительной или умеренной гипертензией, было проведено пилотное исследование, которое включало в себя 24 добровольца. Они получали C. pyrenoidosa (10 г хлореллы в форме таблеток и 100 мл экстракта хлореллы) [87]. После двух месяцев приема хлореллы средняя частота биения сердца, а также систолическое и диастолическое давление сидя лишь слегка изменились. С другой стороны, у некоторых участников исследования с легкой или умеренной гипертензией добавки помогли снизить или контролировать диастолическое давление в сидячем положении.

Жесткость артерий является известным фактором риска сердечно-сосудистых заболеваний [88]. Предыдущие исследования показали, что антиоксиданты [89], калий [90] и n-3 ненасыщенные жирные кислоты [91] снижают артериальную жесткость. Оксид азота (NO), полученный из аргинина в эндотелии сосудов, является важным модулятором жесткости артерий [92]. Продукты с хлореллой содержат антиоксиданты, витамины, калий, аргинин и n-3 ненасыщенные жирные кислоты. Чтобы оценить влияние добавок хлореллы на жесткость артерий, было проведено слепое плацебо-контролируемое перекрестное исследование с участием 14 молодых добровольцев, которые в случайном порядке получали C. pyrenoidosa (6 г в сутки) или плацебо в течение четырех недель с 12-недельным периодом вымывания [93]. До и после приема добавок ни в группах плацебо, так и в группах хлореллы не наблюдалось различий в артериальном давлении или частоте сердечных сокращений. Скорость пульсовой волны на плече-лодыжке, используемая для измерения жесткости артерий, снижалась в группе хлореллы, но не в плацебо-группе [93]. Схожее исследование с участием 32 добровольцев среднего и более старшего возраста показало, что скорость пульсовой волны на плече-лодыжке снизилась после приема хлореллы, но не плацебо [94]. Эти изменения связаны с уровнем NOx в плазме. Результаты позволяют предположить, что пищевые добавки с хлореллой снижают артериальную жесткость как и у более молодых, так и у более взрослых людей.

Эффективность хлореллы в снижении факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний была оценена в ходе метаанализа 19 рандомизированных контролируемых исследований, в которые входило в общей сложность 797 участников [95]. Это исследование заключило, что пищевые добавки с хлореллой нормализуют уровни общего холестерина, липопротеинов низкой плотности, глюкозы в крови натощак, а также систолическое и диастолическое давление, но не влияют на количество триглицеридов, липопротеины высокой плотности и индекс массы тела.

• Антигиперхолестеринемическое и антигиперлипемическое действия

Повышенный уровень общего холестерина и триглицеридов, а также нарушение метаболизма липопротеинов и аполипопротеинов приводят к повышению риска сердечно-сосудистых заболеваний [96–98]. Неперевариваемые компоненты продуктов питания, такие как пищевые волокна, снижают уровень холестерина в сыворотке крови, подавляя всасывание нейтральных стероидов в кишечнике [99]. Продукты с хлореллой по мнению специалистов, снижают уровень холестерина в сыворотке у моделей животных [100]. Чтобы идентифицировать биоактивные соединения, отвечающие за этот эффект, была получена и охарактеризована неперевариваемая фракция C. regularis в форме порошка, которая состояла из 43% сырого белка, 37,3% клетчатки, 6,9% углеводов, 5,4% влаги, 4,3% сырого жира и 2,7% золы [101]. Крысы, в чей рацион входили 5,3% этой неперевариваемой фракции, демонстрировали более низкие уровни холестерина в сыворотке и печени и более высокие уровни нейтральных стероидов в фекалиях по сравнению с грызунами, которые получали 12,7% порошка хлореллы. Как порошок хлореллы, так и неперевариваемая фракция продемонстрировали in vitro высокую способность связывать желчные кислоты. Кроме того, неперевариваемая фракция увеличивала уровни мРНК холестерина 7α-гидроксилазы в печени, которая является ферментом, ограничивающим скорость катаболизма холестерина и синтеза желчной кислоты [102]. Эти результаты указывают на то, что неперевариваемая фракция хлореллы обладает гиперхолестеринемической активностью, которая улучшает катаболизм холестерина, усиливая экспрессию холестерин-7α-гидроксилазы в печени.

Также сообщается, что добавка с хлореллой снизила уровень холестерина в сыворотке крови у пациентов с гиперлипемией и с легкой гиперхолестеринемией в небольшом открытом исследовании [103]. Чтобы оценить превентивную роль хлореллы в поддержании уровня холестерина в сыворотке крови на фоне избыточного потребления холестерина с пищей, было проведено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с участием 63 добровольцев с умеренной гиперхолестеринемией, получавших C. vulgaris (5 г в сутки) или плацебо в течение четырех недель [104]. В аналогичном исследовании были изучены уровни холестерина у 34 участников, получавших 510 мг пищевого холестерина из трех яиц одновременно с хлореллой (C. vulgaris) (5 г в сутки) или с плацебо в течение 4 недель [105]. Участники плацебо-группы продемонстрировали значительное повышение уровня общего холестерина в сыворотке крови, липопротеинов низкой плотности и липопротеинов высокой плотности. Дополнительный прием хлореллы значительно снизил уровень общего холестерина и холестерина липопротеинов низкой плотности, при этом увеличив концентрацию лютеина и α-каротина в сыворотке [105]. У добровольцев с легкой гиперхолестеринемией хлорелла привела к заметным изменениям уровней общего холестерина, триглицеридов, лютеина/зеаксантина и α-каротина, а также к значительному снижению липопротеинов очень низкой плотности, аполипопротеина В, липопротеинов невысокой плотности и триглицеридов/липопротеинов высокой плотности [104]. Эти результаты позволяют предположить, что хлорелла может ингибировать кишечную абсорбцию пищевых и эндогенных липидов. Кроме того, наблюдаемые изменения уровней липидов в сыворотке могут быть связаны с изменениями содержания каротиноидов. Эти результаты показывают, что ежедневное потребление хлореллы улучшает здоровье за счет уменьшения факторов риска накопления липидов в сыворотке, таких как уровни триглицеридов и общего холестерина, у пациентов с легкой гиперхолестеринемией.

• Антидиабетическое действие

Диабет 2 типа, на долю которого приходится 90–95% всех случаев диабета, представляет собой серьезную проблему, с которой столкнулись более 380 миллионов человек во всем мире [106]. Повышенный уровень глюкозы в крови, устойчивость к инсулину и низкая чувствительность к инсулину являются основными признаками пациентов с диабетом 2 типа [107]. Диабет может привести к появлению других серьезных заболеваний, включая атеросклероз, поражение почек и ретинопатию [108]. На модели животных с диабетом, вызванным стрептозотоцином, было проведено несколько исследований для выяснения механизмов, лежащих в основе антидиабетической активности добавок с хлореллой [109 - 111]. Шибата и др. [109] оценили влияние продуктов хлореллы на антиоксидантный статус и катаракту, подкармливая 11-недельных крыс со стрептозотоцин-индуцированным диабетом 7,3% (w/w) порошка хлореллы (C.regularis). После 11 недель приема добавки показатели перекисного окисления (индекс оксидативного статуса) и гликированного гемоглобина в крови были ниже у крыс, получавших хлореллу, чем у контрольных крыс. Однако уровень глюкозы в сыворотке не отличался между группами. Дополнительный прием хлореллы задержало развитие помутнения хрусталика. Эти результаты показывают, что добавки с хлореллой могу быть эффективны в предотвращении осложнений диабета, среди которых катаракта. Эта активность может быть связана с работой ее антиоксидантных соединений.

Чернг и Ши сообщили о потенциальных гипогликемических эффектах добавок хлореллы у мышей с диабетом, индуцированным стрептозотоцином [110]. Пероральное введение хлореллы за 60 мин до получения глюкозы (0,5 г/кг массы тела) приводило к преходящему гипогликемическому эффекту через 90 мин после введения глюкозы без увеличения секреции инсулина. Добавка хлореллы увеличивала поглощение 2-дезоксиглюкозы в печени и камбаловидной мышце у мышей, получавших стрептозотоцин, и, вероятно, была причиной наблюдаемого гипогликемического действия [111].

Профилактическое антидиабетическое действие продуктов хлореллы (C. vulgaris) было изучено Весиной и др.[112]. Ученые исследовали массу тела, профиль липидов, уровень глюкозы в крови, передачу сигналов инсулина в печени, скелетных мышцах и жировой ткани у мышей с ожирением, вызванным питанием с высоким содержанием жиров. Дополнительный прием хлореллы улучшает гликемический контроль при ожирении и диабете, так как снижает устойчивость к инсулину, вызванную повышенной экспрессией переносчика глюкозы 4 посредством активации фосфорилирования протеинкиназы В в скелетных мышцах. Пищевые добавки с хлореллой в сочетании с аэробными упражнениями показалb более выраженное положительное воздействие на гликемический контроль за счет усиления активации передачи сигналов мышечного фосфорилирования у крыс с диабетом 2 типа [113].

Было проведено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с участием 28 добровольцев с пограничным диабетом, получавших либо хлореллу (8 г в сутки), либо плацебо в течение 12 недель [114]. Уровни экспрессии 252 генов, в том числе шести, связанных с диабетом 2 типа, различались между двумя группами. Примечательно то, что уровень экспрессии мРНК резистина, индуктора устойчивости к инсулину, был значительно ниже в группе хлореллы, и коррелировал с уровнями экспрессии гемоглобина A_1c, фактора некроза опухоли-а и интерлейкина-6 [114]. Все эти показатели участвуют в метаболизме глюкозы и/или воспалении.

• Гепатопротекторное действие

Ли и др. [115] продемонстрировали, что у мышей экстракт C. vulgaris оказывает сильное гепатопротекторное действие при остром повреждении печени, вызванным четыреххлористым углеродом. Мыши дополнительно получали экстракт хлореллы в дозировке 50, 100 или 200 мг/кг через день в течение четырех недель. Четыреххлористый углерод вводили внутрибрюшинно через 3 часа после последнего приема хлореллы. Четыреххлористый углерод повышал уровни аланина- и аспартатаминотрансфераз в сыворотке, перекисное окисление липидов и экспрессию цитохрома P450, а также снижал уровни глутатиона и антиоксидантных ферментов. Все эти изменения были значительно ниже в группах, получавших хлореллу (100 и 200 мг/кг). Хотя некроз гепатоцитов был слегка уменьшен в группе, получавшей 50 мг/кг хлореллы, он отсутствовал в группах 100 и 200 мг/кг хлореллы. Эти результаты указывают на то, что экстракт хлореллы проявляет защитную активность на вызванное четыреххлористым углеродом острое повреждение печени у мышей. Предположительно это может быть связано с ингибированием индуцированной четыреххлористым углеродом активации цитохрома Р450 и активацией антиоксидантных ферментов и поглотителей свободных радикалов.

Неалкогольная жировая болезнь печени (НАЖБП) представляет собой группу метаболических нарушений, при которых патологическое накопление жира в гепатоцитах составляет более 5–10% [116]. Этим заболеванием страдают от 10% до 35% населения мира [117]. НАЖБП включает в себя стеатоз, неалкогольный стеатогепатит, фиброз, цирроз и гепатоцеллюлярную карциному [118]. Большинство пациентов с НАЖБП имеют как минимум один характерный метаболический синдром, среди которых устойчивость к инсулину, гипертония, дислипидемия, диабет и ожирение [119]. Семидесяти пациентам с НАЖБП случайным образом вводили C. vulgaris (1,2 г в сутки) или плацебо в течение восьми недель [120]. Средняя масса тела и концентрация ферментов печени в сыворотке были значительно выше в плацебо-группе, а концентрация инсулина в сыворотке была значительно выше в группе хлореллы. Таким образом, добавка хлореллы может оказывать благотворное влияние на снижение массы тела и уровня глюкозы в сыворотке, улучшать биомаркеры воспаления, а также нормализовывать функцию печени у пациентов с НАЖБП [120, 121].

Чтобы оценить безопасность и эффективность хлореллы (C. pyrenoidosa) среди пациентов с хроническим вирусом гепатита С генотипа 1, пациенты перорально принимали пищевые добавки с хлореллой (и экстракт, и таблетки) в течение 12 недель [122]. Большинство пациентов (приблизительно 95%) показали значительное снижение уровня аланинаминотрансферазы за период с первой по двенадцатую недели. Пациенты с пониженной аланинаминотрансферазой продемонстрировали тенденцию к снижению вирусной нагрузки гепатита С.

• Детоксифицирующее действие

Диоксины представляют собой группу полихлорированных дибензо-п-диоксинов и соединений, родственных дибензофурану, которые являются промышленными загрязнителями, пагубно влияющими на окружающую среду [123]. Эти соединения легко всасываются в желудочно-кишечный тракт млекопитающих [124], а затем накапливаются в печени, жировой ткани и грудном молоке благодаря своим липофильным свойствам [125]. Инцидент, связанный с употреблением растительного масла, содержащего диоксины, имел трагические последствия [126]. Чтобы исследовать влияние добавок хлореллы на выведение диоксинов с фекалиями, крысам вводили загрязненное диоксином рисовое масло [127]. Крысы были разделены на 2 группы: те, которые один раз в течение 5 дней эксперимента дополнительно получали 4 г хлореллы (C. vulgaris), и контрольную группу. В ходе эксперимента учитывалось количество диоксинов в фекалиях. У группы, получавшей хлореллу, концентрация диоксинов в стуле оказалась значительно выше. Кроме этого, пищевые добавки с хлореллой значительно замедлили всасывание диоксинов в кишечник (на 2%-53%). Эти результаты указывают на то, что продукты хлореллы могут быть эффективны при выведении диоксинов из организма.

Установлено, что гетероциклические амины являются канцерогенными химикатами, которые образуются, когда аминокислоты, сахара и креатин в мышечном мясе (говядине, свинине, рыбе и домашней птице) вступают в реакцию друг с другом во время приготовления при высокой температуре [128]. Для оценки влияния добавок с хлореллой на выведение канцерогенных гетероциклических аминов было проведено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое перекрестное исследование с использованием 100 мг хлореллы в сутки в течение 2 недель [129]. Продукты с хлореллой снизили выведение с мочой основного метаболита канцероuенных гетероциклических аминов[129]. Это позволяет предположить, что хлорелла или замедляет усвояемость аминов в кишечнике, или инактивирует канцерогенные соединения.

Метилртуть - нейротоксичное соединение металла, которое преобразуется из неорганической ртути микроорганизмами в водной среде и затем накапливается в рыбе и моллюсках, попадая в них по пищевой цепи [130]. Следовательно, основным путем воздействия метилртути на человека является употребление в пищу рыбы и морепродуктов [130]. Во многих странах беременным женщинам рекомендуют отказаться от употребления крупных видов рыбы, такой как тунец, чтобы предотвратить воздействие метилртути на плод [131]. Поскольку, как утверждают ученые, потребление хлореллы увеличивает экскрецию метилртути и снижает уровень ртути в тканях у мышей, получавших метилртуть [132], в течение трех месяцев было проведено открытое клиническое исследование для оценки действия добавок Parachlorella beijerinckii (9 г в сутки) на концентрацию ртути в волосах и крови здоровых людей [133]. Продукты с хлореллой сократили концентрацию ртути как в волосах, так и в крови [133]. Экскреция соединения вместе с фекалиями является основным способом выведения метилртути (90%) у человека[134]. Большая часть метилртути в печени выделяется в виде комплекса глутатиона через желчные протоки, а небольшая часть выводится вместе с фекалиями [135]. Пищевые волокна в клетках хлореллы увеличивают объем стула у человека [136]. In vitro клетчатка продемонстрировала способность поглощать некоторое количество метилртути [123]. Эти наблюдения позволяют предположить, что снижение уровня ртути в волосах и крови участников эксперимента, получавших хлореллу, может быть результатом повышенного выведения метилртути со стулом за счет ускоренного выделения желчи, связывания метилртути с пищевыми волокнами в кишечном тракте и увеличения количества фекалий.

• Иммуномодулирующее действие

Аллергическое заболевание является распространенным аберрантным иммунным ответом на безвредные белки в окружающей среде (антигены) [137]. Аллерген-специфические Т-кдетки CD4+, участвующие в возникновении аллергической реактивности, способны превращаться в Т-хелперы типов 1 или 2 [138]. Т-клетки CD4+, стимулированные в присутствии интерлейкина-12 и γ-интерферона, могут превращаться в Т-хелперы 1-го типа[138], а интерлейкин-4 стимулирует развитие Т-хелперов 2-го типа, ингибируя формирование Т-хелперов 1-го типа [139]. Так как Т-хелперы 1-го и 2-го типа регулируют друг друга, интерлейкин-12 не только индуцирует ответ Т-хелперов типа 1, но и регулирует ответ Т-хелперов типа 2 [140]. Интерлейкин-12 в значительной степени подавляет производство IgE, предотвращая развитие Т-хелперов 2-го типа [141]. Аллерген-специфический IgE индуцирует патогенез аллергического нарушения [142].

Хашегава и др. [143] описали влияние водного экстракта хлореллы (C. vulgaris) на антиген-специфический ответ у мышей. В течение двух недель мыши получали 2% (w/w) водный экстракт хлореллы к основному рациону питания перед введением казеина/полного адъюванта Фрейнда (иммуностимулятора) внутрибрушинно. Контрольная группа хлореллу не получала. Мыши, получавшие экстракт, продемонстрировали снижение производства IgE и экспрессии мРНК интерлейкина-6, участвовавшего в реакции Т-хелперов 2-го типа. У них также наблюдалось повышение уровней интерлейкина-12 и мРНК g-интерферона, стимулирующего ответ Т-хелперов 1-го типа и подавляющего ответ Т-хелперов 2-го типа. Эти результаты позволяют предположить, что дополнительный прием водного экстракта хлореллы может быть эффективен для подавлениz аллергических реакций с преобладанием Т-хелперов 2-го типа. Чтобы объяснить механизмы, лежащие в основе иммуномодулирующего действия водного экстракта хлореллы, из водного экстракта C. pyrenoidosa были получены и охарактеризованы растворимые полисахариды [144]. Анализ ГХ-МС показал, что основными моносахаридными компонентами растворимых полисахаридов являются рамноза (31,8%), глюкоза (20,4%), галактоза (10,3%), манноза (5,2%) и ксилоза (1,3%). Эти растворимые полисазариды вводились внурибрюшинно (100 мг/кг веса) мышам возрастом 6-8 недель. Спустя 24 часа мыши получили липополисахарид в качестве антигена, 1,5 часа спустя был проведен сбор сыворотки крови грызунов [144]. Растворимые полисахариды индуцировали выделение интерлейкина-1b в макрофагах через сигнальный путь Toll-подобного рецептора протеинкиназы. Интерлейкин-1β является одним из наиболее важных медиаторов воспаления и ответа хозяина на инфекцию[145]. Эти результаты говорят о том, что водорастворимые полисахариды хлореллы могут быть использованы в качестве источника агентов для стимуляции активности, защищающей от микроорганизмов.

Гальперин и др. [146] оценили влияние добавок C. Pyrenoidosa (200 или 400 мг) на

иммунную реакцию на вакцину против гриппа. После приема хлореллы в течение 28 дней реакция антител на вакцину от гриппа не была повышена в общей группе участников исследования, но была повышена у добровольцев в возрасте 50–55 лет.

Секреторный иммуноглобулин А в слюне (SIgA) играет важную роль в работе иммунной системы слизистой и является первой линией защиты человека от патогенных микробов [147]. Чтобы выяснить, повышают ли продукты хлореллы секрецию SIgA в слюне у человека, было проведено рандомизированное слепое перекрестное исследование, в ходе которого участники получали хлореллу (C. Pyrenoidosa) (6 г в сутки) или плацебо в течение четырех недель [148]. В плацебо-группе не было отмечено каких-либо различий в уровне SIgA в слюне в начале и в конце эксперимента. Однако среди участников, получавших хлореллу, наблюдалось значительное увеличение показателей секреторного иммуноглобулина А. Скорость выработки SIgA выросла в результате приема хлореллы. Эти результаты предполагают, что дополнительный прием хлореллы в течение 4 недель повышает выработку SIgA и улучшает работу иммунитета в слизистой у человека.

Естественные клетки-киллеры являются преобладающей подгруппой врожденных лимфоцитов, которые опосредуют противоопухолевый и противовирусный ответы [149]. Чтобы оценить влияние добавок хлореллы на активность естественных киллеров и раннюю воспалительную реакцию у людей, было проведено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с участием здоровых взрослых, принимавших хлореллу (C. vulgaris) (5 г в сутки) или плацебо [150]. После восьми недель приема добавки уровни интерферона-γ и интерлейкина-1β в сыворотке были значительно повышены, а уровень интерлейкина-12 в целом увеличился в группе, принимавшей хлореллу. Активность естественных киллеров также была значительно выше в этой группе. Эти результаты свидетельствуют о положительном иммуностимулирующем действии кратковременного приема хлореллы, которая повышает активность естественных киллеров и стимулирует производство интерферона-γ, интерлейкина-12 и интерлейкина-1β.

• Антиоксидантное действие

Сообщается, что водный экстракт C. vulgaris [151] и ацетоновый экстракт [152] обладают противоопухолевой активностью. Водный экстракт хлореллы, содержащий значительное количество антиоксидантов, также проявляет антипролиферативную активность в клетках гепатомы человека [153]. Было обнаружено, что липофильные пигменты, включая каротиноиды антераксантин, зеаксантин и лютеин, полученные из клеток хлореллы, значительно ингибируют рост клеток рака толстой кишки человека [154]. Эти результаты позволяют предположить, что противоопухолевая активность хлореллы может быть результатом синергетического действия нескольких биологически активных соединений. Ромос и др. [155] сообщают, что дополнительный прием хлореллы может модулировать миелопоэтическую активность и устранять подавление различных цитокинов, индуцированных опухолью, и связанных с ними работы клеток у мышей с опухолями. Из культурального супернатанта штамма C. vulgaris CK22 [156]. [157] был получен противоопухолевый гликопротеин массой 63,1 кДа. Его химические и противоопухолевые свойства были охарактеризованы [158], что позволяет предположить возможное влияние этого гликопротеина на наблюдаемую противоопухолевую активность.

Болезнь Альцгеймера — это тяжелое нейродегенеративное заболевание [159]. Известно, что эритроциты пациентов с болезнью Альцгеймера находятся в чрезмерно окисленном состоянии [160]. α-Токоферол и каротиноиды, такие как лютеин, являются важными липофильными антиоксидантами в эритроцитах человека [161]. Было обнаружено, что уровни лютеина в эритроцитах значительно ниже у пациентов с болезнью Альцгеймера по сравнению со здоровыми людьми [162]. Пероральный прием капсул с лютеином повышает его уровень и предотвращает накопление гидроперекиси фосфолипидов в эритроцитах человека [163]. Это позволяет предположить, что пищевой лютеин может действовать как важный антиоксидант в эритроцитах, оказывая благотворное влияние на пациентов с болезнью Альцгеймера. По данным, указанным на этикетках, продукты хлореллы D и M содержат значительное количество лютеина (приблизительно 200 мг/100 г сухого веса). Было проведено рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с участием добровольцев для оценки влияния добавок хлореллы (8 г хлореллы в день; эквивалентно 22,9 мг лютеина в день) на уровни гидроперекиси фосфолипидов и лютеина в эритроцитах [164]. После двух месяцев приема добавок хлореллы уровни лютеина в эритроцитах увеличились в 4,6 раза, однако уровень токоферола не изменился [164]. Возможно, это связано с тем, что ежедневное потребление хлореллы может способствовать улучшению и поддержанию антиоксидантного статуса эритроцитов и уровня лютеина у человека. Эти результаты свидетельствуют о том, что добавки с хлореллой способствуют поддержанию нормальной функции эритроцитов и оказывают благотворное влияние на развитие деменции, связанной с болезнью Альцгеймера, у человека.

Большое депрессивное расстройство — широко распространенное психическое расстройство, которое значительно ухудшает качество жизни человека. Приблизительно 12% людей переживают хотя бы один эпизод депрессии в своей жизни [165]. Хотя для лечения этого недуга доступны различные антидепрессанты, значительная часть пациентов не реагирует на эти препараты, а у некоторых возникают побочные эффекты [166, 167]. По этой причине необходимы другие, альтернативные препараты, борющиеся с депрессией, и обладающие адекватной эффективностью и безопасностью. Учеными был оценен терапевтический эффект приема экстракта C. vulgaris (1,8 г в сутки) в течение шести недель среди пациентов с большим депрессивным расстройством [168]. После лечения у участников эксперимента наблюдалось улучшение физических и когнитивных симптомов депрессии [168]. Поскольку оксидативный стресс является важным патофизиологическим механизмом, лежащим в основе большого депрессивного расстройства, это нарушение было эффективно купировано с помощью антиоксидантной терапии [169, 170]. Наблюдения позволяют предположить, что терапевтическая эффективность добавок с хлореллой может быть связана с действием ее антиоксидантных питательных веществ и соединений [171].

• Другие действия

Как известно, стресс влияет на гомеостаз, нарушая работу иммунитета. Добавки с хлореллой стимулируют пул гемопоэтических стволовых клеток и активируют лейкоциты [172]. Чтобы лучше понять влияние хлореллы (C. Vulagaris)) на гемопоэз, были измерены популяции гемопоэтических клеток в костном мозге мышей, подвергшихся однократному или многократному воздействию стрессора [173]. В результате лечения с применением любого стрессора наблюдалось снижение показателей количества гемопоэтических клеток-предшественников в костном мозге. Оба стрессора привели к снижению зрелых миелоидных и лимфоидных популяций, но не влияли на плюрипотентных гемопоэтических предшественников. Оба стрессора снизили уровни интерлейкина-1α и интерлейкина-6. Пищевые добавки хлореллы предотвратили изменения, вызванные обоими стрессорами, по всем тестируемым параметрам. Это позволяет предположить, что добавление хлореллы является эффективным средством профилактики миелосупрессии, вызванной одиночными или повторяющимися стрессорами.

Стресс обрабатывается в головном мозге через активацию различных видов нейронов. Непосредственно ранние гены, такие как c-fos, широко применяются для определения областей головного мозга, участвующий в реакции на стресс [174]. Используя экспрессию c-fos, Кейроз и др. [175] оценили влияние экстренной предварительной обработки хлореллой (C. vulgaris) на периферические и центральные реакции на стресс у принудительного плавающих крыс. Добавка хлореллы вызывала значительное снижение связанной со стрессом активации гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой оси из-за снижения экспрессии гена рилизинг-фактора кортикотропина в гипоталамическом паравентрикулярном ядре и более низкой реакции адренокортикотропного гормона. Аналогичным образом снижалась и гипергликемия, вызванная стрессом. Эти результаты показывают, что добавки с хлореллой могут уменьшить влияние стрессоров.

Водный экстракт хлореллы (C. pyrenoidosa) увеличивал продолжительность жизни мутантных по супероксиддисмутазе-1 взрослых особей Drosophila melanogaster дозозависимым образом (200–800 мкг/мл) [176]. Активное соединение было очищено и идентифицировано как фенетиламин, ароматический амин, который не проявлял активности, подобной супероксиддисмутазе. Лечение с использованием этого соединения увеличивало продолжительность жизни мутантных мух при очень низкой концентрации (60 нг/г рациона) [176]. Дополнительный прием C. sorokiniana (4 мг/мл), как сообщается, также увеличил продолжительность жизни D. melanogaster на 10% по сравнению с контрольной группой. Это может быть связано с повышенной экспрессии мРНК антиоксидантных ферментов (Cu/Zn-супероксиддисмутазы и каталазы) [177].

Однако на людях исследований положительного влияния хлореллы, описанного выше, пока не проводилось.

Заключение

Коммерчески доступные продукты хлореллы содержат различные питательные вещества, необходимые для человека, а также большое количество качественного белка, пищевых волокон и полиненасыщенных жирных кислот, в том числе α-линоленовую и линолевую кислоты. Так, продукты с хлореллой содержат витамины D₂ и B₁₂, которые отсутствуют в продуктах растительного происхождения, а также больше фолиевой кислоты и железа, чем другие растительные продукты. В исследованиях на животных и людях было представлено все больше научных доказательств пользы ежедневного потребления хлореллы. Фармакологическая активность, о которой сообщалось в исследованиях хлореллы, включает иммуномодуляцию, антиоксидантную активность и предотвращение диабета, гипертензии и гиперлипемии. Полезные свойства хлореллы могут быть связаны с синергетическим действием ряда питательных веществ и антиоксидантных соединений. В целом, информации о биологически активных соединениях хлореллы пока недостаточно, поэтому в будущих исследованиях могут быть идентифицированы новые биоактивные соединения, ответственные за ее фармакологическую активность.

Участие авторов: Т. Б., Э. О., М. Ф. и Ф. В. организовали и провели данное исследование. Т. Б. и Ф. В. написали первый черновик. Э. О. и М. В. провели редакцию рукописи. Все авторы ознакомились и согласились с опубликованной версией рукописи.

Финансирование: Данное исследование не получали внешнего финансирования.

Конфликт интересов: Авторы заявили об отсутствии конфликта интересов.

Библиографический список

1. Yan, N.; Fan, C.; Chen, Y.; Hu, Z. The potential for microalgae as bioreactors to produce pharmaceuticals.

Int. J. Mol. Sci. 2016, 17, 962. [CrossRef] [PubMed]

2. Barkia, I.; Saari, N.; Manning, S.R. Microalgae for high-value products towards human health and nutrition.

Mar. Drugs 2019, 17, 304. [CrossRef] [PubMed]

3. Beijerinck, M.W. Culturversuche mit Zoochlorellen, Lichenengonidien und anderen niederen Algen.

Botanische Zeitung 1890, 47, 725–739.

4. Chick, H. A study of a unicellular green alga, occurring in polluted water, with especial reference to its nitrogenous metabolism. Royal Soc. Biol. Sci. Ser. B 1903, 71, 458–476.
5. Wu, H.L.; Hseu, R.S.; Lin, L.P. Identification of Chlorella isolates using ribosomal DNA sequences.

Bot. Bull. Acad. Sin. 2001, 42, 115–121.

6. Krienitz, L.; Hegewald, E.H.; Hepperle, D.; Huss, V.A.R.; Rohr, T.; Wolf, M. Phylogenetic relationship of

Chlorella and Parachlorella gen. nov. (Chloropyta, Trebouxiophyceae). Phycologia 2004, 43, 529–542. [CrossRef]

7. Sorokin, C.; Myers, J. A high-temperature strain of Chlorella. Science 1953, 117, 330–331. [CrossRef]
8. Lizzul, A.M.; Lekuona-Amundarain, A.; Purton, S.; Campos, L.C. Characterization of Chlorella sorokiniana, UTEX 1230. Biology 2018, 7, 25. [CrossRef]
9. Montoya, E.Y.O.; Casazza, A.A.; Aliakbarian, B.; Perego, P.; Converti, A.; Carvalho, M. Production of Chlorella vulgaris as a source of essential fatty acids in a tubular photobioreactor continuously fed with air enriched with CO2 at different concentrations. Prog. 2014, 30, 916–922. [CrossRef]
10. Rani, K.; Sandal, N.; Sahoo, P.K. A comprehensive review on chlorella-its composition, health benefits,

market and regulation scenario. Pharma Innov. J. 2018, 7, 583–589.

11. De Ortega, A.R.; Roux, J.C. Production of Chlorella biomass in different types of Flat bioreactors in temperate Biomass 1986, 10, 141–156. [CrossRef]
12. Ru, I.T.K.; Sung, Y.Y.; Jusoh, M.; Wahid, M.E.A. Chlorella vulgaris: A perspective on its potential for combining high biomass with high value bioproducts. Phycol. 2020, 1, 2–11. [CrossRef]
13. Shukla, S.P.; Kvíderová, J.; Tríska, J.; Elster, J. Chlorella mirabilis as a potential species for biomass production in low-temperature environment. Microbiol. 2013, 4, 97. [CrossRef] [PubMed]
14. Ward, V.C.A.; Rehmann, L. Rast media optimization for mixotrophic cultivation of Chlorella vulgaris. Rep.

2019, 9, 19262. [CrossRef]

15. Komaki, H.; Yamashita, M.; Niwa, Y.; Tanabe, Y.; Kamiya, N.; Ando, Y.; Furuse, M. The effect of processing of Chlorella vulgaris: K-5 on in vitro and in vivo digestibility in rats. Feed Sci. Technol. 1998, 70, 363–366. [CrossRef]
16. Chisti, Y. Biodiesel from microalgae. Adv. 2007, 25, 294–306. [CrossRef]
17. Becker, E.W. Micro-algae as a sourse of protein. Adv. 2007, 25, 207–210. [CrossRef]
18. Waghmare, A.G.; Salve, M.K.; LeBlanc, J.G.; Arya, S.S. Concentration and characterization of microalgae proteins from Chlorella pynenoidosa. Bioprocess. 2016, 3, 16. [CrossRef]
19. Kent, M.; Welladsen, H.M.; Mangott, A.; Li, Y. Nutritional evaluation of Australian microalgae as potential human health supplements. PLoS ONE 2015, 10, e0118985. [CrossRef]
20. Morris, S.M., Jr. Recent advances in arginine metabolism: Roles and regulation of the arginases. J. Pharm.

2009, 157, 922–930. [CrossRef]

21. Bansal, V.; Ochoa, J.B. Arginine availability, arginase, and the immune response. Opin. Clin. Nutr. Metab. Care 2003, 6, 223–228. [CrossRef] [PubMed]
22. Olaitan, S.A.; Northcote, D.H. Polysaccharides of Chlorella pyrenoidosa. J. 1962, 82, 509–519. [CrossRef] [PubMed]
23. Sui, Z.; Gizaw, Y.; BeMiller, J.N. Extraction of polysaccharides from a species of Chlorella. Polym.

2012, 90, 1–7. [CrossRef] [PubMed]

24. Yu, M.; Chen, M.; Gui, J.; Huang, S.; Liu, Y.; Shentu, H.; He, J.; Fang, Z.; Wang, W.; Zhag, Y. Preparation of Chlorella vulgaris polysaccharides and their antioxidant activity in vitro and in vivo. J. Biol. Macromol. 2019, 137, 139–150. [CrossRef] [PubMed]
25. El-Naggar, N.E.A.; Hussein, M.H.; Shaaban-Dessuuki, S.A.; Dalal, S.R. Production, extraction and characterization of Chlorella vulgaris soluble polysaccharaides and their applications in AgNPs biosynthesis and biostimulation of plant growth. Rep. 2020, 10, 3011. [CrossRef]
26. Tabarsa, M.; Shin, I.S.; Lee, J.H.; Surayot, U.; Park, W.J.; You, S.G. An immune-enhancing water-soluble a-glucan from Chlorella vulgaris and structural characteristics. Food Sci. Biotechnol. 2015, 24, 1933–1941. [CrossRef]
27. Ötles, S.; Pire, R. Fatty acid composition of Chlorella and Spirulina microalgae species. AOAC Int. 2001, 84, 1708–1714. [CrossRef]
28. Panahi, Y.; Khosroshahi, A.Y.; Sahebkar, A.; Heidari, H.R. Impact of cultivation condition and media content on Chlorella vulgaris Adv. Pharm. Bull. 2019, 9, 182–194. [CrossRef]
29. Chiu, S.Y.; Kao, C.Y.; Chen, T.Y.; Chang, Y.B.; Kuo, C.M.; Lin, C.S. Cultivation of microalgal Chlorella for biomass and lipid production using wastewater as nutrient resource. Technol. 2015, 184, 179–189. [CrossRef]
30. Mao, X.; Wu, T.; Sun, D.; Zhang, Z.; Chen, F. Differential responses of the green microalga Chlorella zofingiensis

to the starvation of various nutrients for oil and astaxanthin production. Bioresour. Technol. 2018, 249, 791–798. [CrossRef]

31. Woortman, D.V.; Fuchs, T.; Striegel, L.; Fuchs, M.; Weber, N.; Brück, T.B.; Rychlik, M. Microalae a superior source of folates: Quantification of folates in halophile microalgae by stable isotope dilution Front. Bioeng. Biotechnol. 2020, 7, 481. [CrossRef] [PubMed]
32. Lips, P. Vitamin D physiology. Biophys. Mol. Biol. 2006, 92, 4–8. [CrossRef] [PubMed]
33. Taofiq, O.; Fernandes, A.; Barreiro, M.F.; Ferreira, I.C.F.R. UV-irradiated mushrooms as a source of vitamin D2: A review. Trends Food Sci. Technol. 2017, 70, 82–94. [CrossRef]
34. Holman, E.H.; Martin, B.R.; Lackcik, P.L.; Godeon, D.T.; Fleet, J.C.; Weaver, C.M. Bioavailability and efficacy

of vitamin D2 from UV-irradiated yeast in growing, vitamin D-deficient rats. J. Agric. Food Chem. 2011, 59, 2341–2346.

35. Ložnjak, P.; Jakobsen, J. Stability of vitamin D3 and vitamin D2 in oil, fish and mushrooms after household Food Chem. 2018, 254, 144–149. [CrossRef]
36. Cardwell, G.C.; Bornman, J.F.; James, A.P.; Black, L.J. A review of mushrooms as a potential source of dietary vitamin D. Nutrients 2018, 10, 1498. [CrossRef]
37. Weete, J.D.; Abril, M.; Blackwell, M. Phylogenetic distribution of fungal sterols. PLoS ONE 2010, 5, e10899. [CrossRef]
38. Huang, G.; Cai, W.; Xu, B. Vitamin D2, ergosterol, and vitamin B2 content in commercially dried mushrooms.

Int. J. Vitam. Nutr. Res. 2016, 1, 1–10.

39. Urbain, P.; Singler, F.; Ihorst, G.; Biesalski, H.K.; Bertz, H. Bioavailability of vitamin D2 from UV-B-irradiated button mushrooms in healthy adults deficient in serum 25-hydroxyvitamin D: A randomized controlled trial. J. Clin. Nutr. 2011, 65, 965–971. [CrossRef]
40. Cashman, K.D.; Kiely, M.; Seamans, K.M.; Urbain, P. Effect of Ultraviolet light-exposed mushrooms on vitamin D status: Liquid chromatography-tandem mass spectrometry reanalysis of biobanked sera from a randomized controlled trial and a systematic review plus meta-analysis. Nutr. 2016, 146, 565–575. [CrossRef]
41. Klosty, M.; Bergmann, W. Sterols of algae. III. The occurrence of ergosterol in Chlorella pyranoidosa. Am. Chem. Soc. 1952, 74, 1601. [CrossRef]
42. Patterson, G.W. Sterols of Chlorella. II. The occurrence of an unusual sterol mixture in Chlorella vulgaris. Physiol. 1967, 42, 1457–1459. [CrossRef] [PubMed]
43. Wu, J.; Liu, C.; Lu, Y. Preparative separation of phytosterol analogues from green alga Chlorella vulgaris using recycling counter-current chromatography. Separ. Sci. 2017, 40, 2326–2334. [CrossRef] [PubMed]
44. Wilson, L.R.; Tripkovic, L.; Hart, K.H.; Lanham-New, S.A. Vitamin D deficiency as a public health issue: Using vitamin D2 or vitamin D3 in future fortification strategies. Nutr. Soc. 2017, 106, 481–490. [CrossRef]
45. Selhub, ; Jacques, P.F.; Bostom, A.G.; D’Agostino, R.B.; Wilson, P.W.F.; Belanger, A.J.; O’Leary, D.H.; Wolf, P.A.; Schaffer, E.J.; Rosenberg, I.H. Association between plasma homocysteine concentrations and extracranial carotid-artery stenosis. N. Engl. J. Med. 1995, 332, 286–291. [CrossRef]
46. Ganguly, P.; Alam, S.F. Role of homocysteine in the develop of cardiovascular disease. J. 2015, 14, 6. [CrossRef]
47. Green, R.; Allen, L.H.; Bjorke-Mercado, A.L.; Brto, A.; Gueant, J.L.; Miller, J.W.; Molloy, A.M.; Nexo, E.; Stabler, S.; Toh, B.H.; et al. Vitamin B12 Nat. Rev. Dis. Prim. 2017, 3, 17040. [CrossRef]
48. Miller, J.W.; Ribaya-Meercado, J.D.; Russell, R.M.; Shepard, D.C.; Morrow, F.D.; Cochary, E.F.; Sadowski, J.A.;

Gershoff, S.N.; Selhub, J. Effect of vitamin B6-deficiency on fasting plasma homocysteine concentrations.

Am. J. Clin. Nutr. 1992, 55, 1154–1160. [CrossRef]

49. Forges, T.; Monnier-Barbarino, P.; Alberto, J.M.; Gueant-Rodriguez, R.M.; Daval, J.L.; Gueant, J.L. Impact of folate and homocysteine metabolism on human reproductive health. Reprod. Update 2007, 13, 225–238. [CrossRef]
50. Celik, S.F.; Celik, E. Subclinical atherosclerosis and impaired cardiac autonomic control in pediatric patients with vitamin B12 Niger. J. Clin. Pract. 2018, 21, 1012–1016.
51. Bunout, D.; Petermann, M.; Hirsch, S. Low serum folate but normal homocysteine levels in patients with

atherosclerotic vascular disease and matched healthy controls. Nutrition 2000, 16, 434–438. [CrossRef]

52. Czeizel, A.E.; Dudás, I.; Vereczkey, A.; Bránhidy, F. The prevention of neural-tube defects and congenital heart defects. Nutrients 2013, 5, 4760–4775. [CrossRef] [PubMed]
53. Gorelova, V.; Ambach, L.; Rébeillé, F.; Stove, C.; Van der Straeten, D. Fotes in plants: Research advances and progress in crop biofortification. Chem. 2017, 5, 21. [CrossRef] [PubMed]
54. Delchier, N.; Herbig, A.L.; Rychlik, M.; Renard, M.G.C. Folates in fruits and vegetables: Contents, processing and stability. Rev. Food Sci. Food Saf. 2016, 15, 506–528. [CrossRef]
55. Watanabe, F.; Bito, T. Corrinoids in food and biological samples. In Frontiers in Natural Product Chemistry; Atta-ur-Rahman, Ed.; Bentham Science Publishers: Dubai, UAE, 2016; Volume 2, pp. 229–244.
56. Watanabe, F.; Bito, T. Vitamin B12 sources and microbial interaction. Biol. Med. 2018, 243, 148–158. [CrossRef]
57. Bito, T.; Tanioka, Y.; Watanabe, F. Characterization of vitamin B12 compounds from marine foods. Sci.

2018, 84, 747–755. [CrossRef]

58. Kittaka-Katsura, H.; Fujita, T.; Watanabe, F.; Nakano, Y. Purification and characterization of a corrinoid compound from Chlorella Tablets as an algal health food. Agric. Food Chem. 2002, 50, 4994–4997. [CrossRef]
59. Bito, T.; Bito, M.; Asai, Y.; Takenaka, S.; Yabuta, Y.; Tago, K.; Ohnishi, M.; Mizoguchi, T.; Watanabe, F. Characterization and quantitation of vitamin B12 compounds in various Chlorella J. Agric. Food Chem. 2016, 64, 8516–8524. [CrossRef]
60. Watanabe, F.; Abe, K.; Takenaka, S.; Tamura, Y.; Maruyama, I.; Nakano, Y. Occurrence of cobalamin coenzymes in the photosynthetic green alga, Chlorella vulgaris. Biotechnol. Biochem. 1997, 61, 896–897. [CrossRef]
61. Rauma, A.L.; Törrönen, R.; Hänninen, O.; Mykkänen, H. Vitamin B12 status of long-term adherents of strict uncooked vegan diet (“living food diet”) is comprised. Nutr. 1995, 125, 2511–2515.
62. Merchant, R.E.; Phillips, T.W.; Udani, J. Nutritional supplementation with Chlorella pyrenoidosa lowers serum methylmalonic acid in vegans and vegetarians with a suspected vitamin B12 J. Med. Food 2015, 18, 1357–1362. [CrossRef] [PubMed]
63. Camaschella, C. Iron-deficiency anemia. Engl. J. Med. 2015, 372, 1832–1843. [CrossRef] [PubMed]
64. Adrogué, H.J.; Madias, N.E. Sodium and potassium in pathogenesis of hypertension. Engl. J. Med. 2007,

356, 1966–1978. [CrossRef] [PubMed]

65. Hentze, M.W.; Muckenthaler, M.U.; Galy, B.; Camaschella, C. Two to tango: Regulation of mammalian iron Cell 2010, 142, 24–38. [CrossRef] [PubMed]
66. Gibson, R.S.; Raboy, V.; King, J.C. Implication of phytate in plant-based foods for iron and zinc bioavailability, setting dietary requirements, and formulating programs and policies. Rev. 2018, 76, 793–804. [CrossRef] [PubMed]
67. Gao, F.; Guo, W.; Zeng, M.; Feng, Y.; Feng, G. Effect of microalgae as iron supplements on ion-deficiency

anemia in rats. Food Funct. 2019, 10, 723–732. [CrossRef]

68. Nakano, S.; Takekoshi, H.; Nakano, M. Chlorella pyrenoidosa supplementation reduces the risk of anemia, proteinuria and edema in pregnant women. Plant Food Hum. Nutr. 2010, 65, 25–30. [CrossRef]
69. Rayman, M.P. The importance of selenium to human health. Lancet 2000, 356, 233–241. [CrossRef]
70. Allen, C.B.; Lacourciere, G.M.; Stadtman, T.C. Responsiveness of selenoproteins to dietary selenium.

Ann. Rev. Nutr. 1999, 19, 1–16. [CrossRef]

71. Sunde, R.A. Handbook of nutritionally essential mineral elements. In Handbook of Nutritionally Essential Mineral Elements; O’Dell, B.L., Sunde, R.A., Eds.; Marcel Dekker Inc: New York, NY, USA, 1997; pp. 493–556.
72. White, P.J.; Brown, H.C.; Parmaguru, P.; Fritz, M.; Spracklen, W.P.; Spiby, R.E.; Meacham, M.C.; Trueman, L.J.; Smith, B.M.; Thomas, B.; et al. Interactions between selenium and Sulphur nutrition in Arabidopsis thaliana. Exp. Bot. 2004, 55, 1927–1937. [CrossRef]
73. Doucha, J.; Lívanský, K.; Kotrbácˇek, V.; Zachleder, V. Production of Chlorella biomass enriched by selenium and its use in animal nutrition: A review. Microbiol. Biotechnol. 2009, 83, 1001–1008. [CrossRef] [PubMed]
74. Sun, X.; Zhong, Y.; Huang, Z.; Yang, Y. Selenium accumulation in unicellular green alga Chlorella vulgaris and its effects on antioxidant enzymes and content of photosynthetic pigments. PLoS ONE 2014, 9, e112270. [CrossRef] [PubMed]
75. Chen, T.F.; Zheng, W.J.; Wong, Y.S.; Yang, F. Selenium-induced changes in activities of antioxidant enzymes and content of photosynthetic pigments in Spirulina platensis. Integr. Plant. Biol. 2008, 50, 40–48. [CrossRef] [PubMed]
76. Nisar, N.; Li, L.; Lu, S.; Khin, N.C.; Pogson, B.J. Carotenoid metabolism in plants. Plant. 2015, 8, 68–82. [CrossRef]
77. Sathasivam, R.; Radhakrishnan, R.; Hashem, A.; Abd_Allah, E.F. Microalgae metabolites: A rich source for food and medicine. Saudi J. Biol. Sci. 2019, 26, 709–722. [CrossRef]
78. Raja, R.; Hemaiswarya, S.; Rengasamy, R. Exploitation of Dunaliella for β-carotene production.

Appl. Microbiol. Biotechnol. 2007, 74, 517–523. [CrossRef]

79. Boussiba, S.; Bing, W.; Yuan, J.P.; Zarka, A.; Chen, F. Changes in pigments profile in the green alga

Haeamtococcus pluvialis exposed to environmental stresses. Biotechnol. Lett. 1999, 20, 601–604. [CrossRef]

80. O’Sullivan, A.M.; O’Callaghan, Y.C.; O’Connor, T.P.; O’Brien, N.M. The content and bioaccessibility of carotenoids from selected commercially available health supplements. Nutr. Soc. 2011, 70, E62. [CrossRef]
81. Guedes, A.C.; Amaro, H.M.; Malcata, F.X. Microalgae as sources of carotenoids. Drugs 2011, 9, 625–644. [CrossRef]
82. Plaza, M.; Herrero, M.; Cifuentes, A.; Ibα´añez, E. Innovative natural functional ingredients from microalgae.
83. Agric. Food Chem. 2009, 57, 7159–7170. [CrossRef]
84. Lui, J.; Sun, Z.; Gerken, H.; Liu, S.; Jiang, Y.; Chen, F. Chlorella zofingiensis as an alternative microalgal producer of astaxanthin: Biology and industrial potential. Drugs 2014, 12, 3487–3515.
85. McFarlane, S.I.; Jean-Lours, G.; Zizi, F.; Whaley-Connel, A.T.; Ogedegbe, O.; Nakaryus, A.N.; Maraj, I. Hypertension in the high-cardiovascular-risk populations. J. Hypertens. 2012, 2011, 746369. [CrossRef] [PubMed]
86. Yamori, Y. Experimental evidence for dietary prevention of cardiovascular disease. Exp. Pharm. Physiol.

1989, 16, 303–307. [CrossRef] [PubMed]

86. Sansawa, H.; Takahashi, M.; Tsuchikura, S.; Endo, H. Effect of Chlorella and its fractions on blood pressure, cerebral stroke lesions, and life-span in stroke-prone spontaneously hypertensive rats. Nutr. Sci. Vitam. 2006, 52, 457–466. [CrossRef] [PubMed]
87. Merchant, R.E.; Andre, C.A.; Sica, D.A. Nutritional supplementation with Chlorella pyrenoidosa for mild to moderate hypertension. Med. Food 2002, 5, 141–152. [CrossRef] [PubMed]
88. Vlachopoulos, C.; Aznaouridis, K.; Terentes-Printzios, D.; Ioakeimidis, N.; Stefanadis, C. Prediction of cardiovascular events and all-cause mortality with brachial-ankle elasticity index: A systematic review and meta-analysis. Hypertension 2012, 60, 556–562. [CrossRef]
89. Plantinga, Y.; Ghiadoni, L.; Magagna, A.; Giannarelli, C.; Franzoni, F.; Salvetti, A. Supplementation with vitamins C and E improves arterial stiffness and endothelial function in essential hypertensive patients. J. Hypertens. 2007, 20, 392–397. [CrossRef]
90. Nestel, P.J.; Pomeroy, S.E.; Sasahara, T.; Yamashita, T.; Ling, Y.L.; Dart, A.M.; Jennings, G.L.; Abbey, M.; Cameron, J.D. Arterial compliance in obese subjects is improved with dietary plant n-3 fatty acid from flaxseed oil despite increased LDL oxidizability. Thromb. Vasc. Biol. 1997, 17, 1163–1170. [CrossRef]
91. He, F.J.; Marciniak, M.; Carney, C.; Markandu, N.D.; Anand, V.; Fraser, W.D.; Dalton, R.N.; Kaski, J.C.; MacGregor, G.A. Effects of potassium chloride and potassium bicarbonate on endothelial function, cardiovascular risk factors, and bone turnover in mild hypertensives. Hypertension 2010, 55, 681–688. [CrossRef]
92. Kinlay, S.; Creager, M.A.; Fukumoto, M.; Hikita, H.; Fang, J.C.; Selwyn, A.P.; Ganz, P. Endothelium-derived nitric oxide regulates arterial elasticity in human arteries in vivo. Hypertension 2001, 38, 1049–1053. [CrossRef]
93. Osuki, T.; Shimizu, K.; Iemitsu, M.; Kono, I. Multicomponent supplement containing Chlorella decreases arterial stiffness in healthy young men. Clin. Biochem. Nutr. 2013, 53, 166–169. [CrossRef] [PubMed]
94. Otuski, T.; Shimizu, K.; Maeda, S. Changes in arterial stiffness and nitric oxide production with Chlorella-derived multicomponent supplementation in middle-aged and older individuals. Clin. Biochem. Nutr. 2015, 57, 228–232. [CrossRef] [PubMed]
95. Fallah, A.A.; Sarmast, E.D.; Dehkordi, S.H.; Engardeh, J.; Mahmoodnia, L.; Khaledifar, A.; Jafari, T. Effect of

Chlorella supplementation on cardiovascular risk factors: A meta-analysis of randomized controlled trials.

Clin. Nutr. 2018, 37, 1892–1901. [CrossRef] [PubMed]

96. Mora, S.; Otvos, J.D.; Rifai, N.; Rosenson, R.S.; Buring, J.E.; Ridker, P.M. Lipoprotein particle profiles by nuclear magnetic resonance compared with standard lipids and apolipoproteins in predicting incident cardiovascular disease in women. Circulation 2009, 119, 931–939. [CrossRef]
97. Nordestgaard, B.G.; Benn, M.; Schnohr, P.; Tybjaerg-Hansen, A. Nonfasting triglycerides and risk of myocardial infarction, ischemic heart disease, and death in men and women. Am. Med Assoc. 2007, 298, 299–308. [CrossRef]
98. Sacks, F.M.; Alaupovic, P.; Moye, L.A.; Cole, T.G.; Sussex, B.; Stampfer, M.J.; Pfeffer, M.A.; Braunwald, E.

VLDL, apolipoproteins B, CIII and E, and risk of recurrent coronary events in the cholesterol and recurrent events (CARE) trial. Circulation 2000, 102, 1886–1892. [CrossRef]

99. Adnerson, J.W.; Deakins, D.A.; Bridges, S.R. Soluble fiber: Hypocholesteromic effects and proposed

mechanisms. In Dietary Fiber: Chemistry, Physiology and Health Effects; Kritchevsky, D., Bonfield, C., Anderson, J.W., Eds.; Plenum Press: New York, NY, USA, 1990; pp. 339–363.

100. Cherng, J.Y.; Shih, M.F. Preventing dyslipidemia by Chlorella pyrenoidosa in rats and hamsters after chronic high fat diet treatment. Life Sci. 2005, 76, 3001–3013. [CrossRef]
101. Shibata, S.; Oda, K.; Onodera-Masuoka, N.; Matsubara, S.; Kikuchi-Hayakawa, H.; Ishikawa, F.; Iwabuchi, A.; Sansawa, H. Hypocholesteromic effect of indigestible fraction of Chlorella regularis in cholesterol-fed rats.
102. Nutr. Sci. Vitam. 2001, 47, 373–377. [CrossRef]
103. Shibata, S.; Hayakawa, K.; Egashira, Y.; Sanada, H. Hypocholesteromic mechanism of Chlorella: Chlorella and its indigestible fraction enhance hepatic cholesterol catabolism through up-regulation of cholesterol 7α-hydroxylase in rats. Biotechnol. Biochem. 2007, 71, 916–925. [CrossRef]
104. Sansawa, H.; Inoue, K.; Shirai, T. Effect of Chlorella tablet ingestion on mild hypercholesterolemic patients.
105. Jpn. Soc. Food Sci. Technol. 2002, 49, 167–173. [CrossRef]
106. Ryu, N.H.; Lim, Y.; Park, J.E.; Kim, J.; Kim, J.Y.; Kwon, S.W.; Kwon, O. Impact of daily Chlorella consumption on serum lipid and carotenoid profiles in mild hypercholesterolemic adults: A double-blinded, randomized, placebo-controlled study. J. 2014, 13, 57. [CrossRef] [PubMed]
107. Kim, S.; Kim, J.; Lim, Y.; Kim, Y.J.; Kim, J.Y.; Kwon, O. A dietary cholesterol challenge study to assess Chlorella supplementation in maintaining healthy lipid levels in adults: A double-blinded, randomized, placebo-controlled study. J. 2016, 15, 54. [CrossRef] [PubMed]
108. Caruso, R.; Magon, A.; Baroni, I.; Dellafiore, F.; Arrigoni, C.; Pittella, F.; Ausili, D. Health literacy in type 2 diabetes patients: A systematic review of systematic reviews. Acta Diabetol. 2018, 55, 1–2. [CrossRef] [PubMed]
109. Schwingshackl, L.; Chaimani, A.; Hoffmann, G.; Schwedhelm, C.; Boeing, H. Impact of different dietary

approaches on glycemic control and cardiovascular risk factors in patients with type 2 diabetes: A protocol for a systematic review and network meta-analysis. Sys. Rev. 2017, 6, 57. [CrossRef]

108. De Groot, M.; Anderson, R.; Freedland, K.E.; Clouse, R.E.; Lustman, P.J. Association for depression and diabetes complications: A meta-analysis. Med. 2001, 63, 619–630. [CrossRef]
109. Shibata, S.; Natori, Y.; Nishihara, T.; Tomisaka, K.; Matsumoto, K.; Sansawa, H.; Nguyen, V.C. Antioxidant and anti-cataract effects of Chlorella on rats with streptozotocin-induced diabetes. Nutr. Sci. Vitam. 2003, 49, 334–339. [CrossRef]
110. Cherng, J.Y.; Shih, M.F. Potential hypoglycemic effects of Chlorella in streptozotocin-induced diabetic mice.

Life Sci. 2005, 77, 980–990.

111. Cherng, J.Y.; Shih, M.F. Improving glycogenesis in streptozotocin (STZ) diabetic mice after administration of green algae Chlorella. Life Sci. 2006, 78, 1181–1186. [CrossRef]
112. Vecina, J.F.; Oliveira, A.G.; Araujo, T.G.; Baggio, S.R.; Torello, C.O.; Saad, M.J.A.; Queiroz, L.S. Chlorella modulates insulin signaling pathway and prevents high-fat diet-induced insulin resistance in mice. Life Sci. 2014, 95, 45–52. [CrossRef]
113. Horii, N.; Hasegawa, N.; Fujii, S.; Uchida, M.; Iemitsu, K.; Inoue, K.; Iemitsu, M. Effect of combination of

chlorella intake and aerobic exercise training on glycemic control in type 2 diabetic rats. Nutrition 2019,

63–64, 45–50. [CrossRef]

114. Itakura, H.; Kobayashi, M.; Nakamura, S. Chlorella ingestion suppresses resistin gene expression in peripheral blood cells of borderline diabetics. Nutr. ESPEN 2015, 10, e95–e101. [CrossRef] [PubMed]
115. Li, L.; Kim, Y.; Lee, Y.W. Chlorella vulgaris extract ameliorates carbon tetrachloride-induced acute hepatic injury in mice. Toxicol. Pathol. 2013, 65, 73–80. [CrossRef] [PubMed]
116. Paradis, V.; Bedossa, P. Definition and natural history of metabolic steatosis: Histology and cellular aspects.

Diabetes Metab. 2008, 34, 638–642. [CrossRef]

117. Schwimmer, J.B.; Deutsch, R.; Kahen, T.; Lavine, J.E.; Stanley, C.; Behling, C. Prevalence of fatty liver in children and adolescents. Pediatrics 2006, 118, 1388–1393. [CrossRef] [PubMed]
118. Ben, M.D.; Polimeni, L.; Baratta, F.; Pastori, D.; Loffredo, L.; Angelico, F. Modern approach to the clinical

management of non-alcoholic fatty liver disease. World J. Gastroentrol. 2014, 20, 8341–8350. [CrossRef]

119. Yki-Järvinen, H. Non-alcoholic fatty liver disease as a cause and a consequence of metabolic syndrome.

Lancet Diabetes Endocrinol. 2014, 2, 901–910. [CrossRef]

120. Ebrahimi-Mameghani, ; Sadeghi, Z.; Farhangi, M.A.; Vaghef-Mehrabany, E.; Aliashrafi, S. Glucose homeostasis, insulin resistance and inflammatory biomarkers in patients with non-alcoholic fatty liver disease: Beneficial effects of supplementation with microalgae Chlorella vulgaris: A double-blind placebo-controlled randomized clinical trial. Clin. Nutr. 2017, 36, 1001–1006. [CrossRef]

121. Ebrahimi-Mameghani, M.; Aliashrafi, S.; Javadzadeh, Y.; AsghariJafarabadi, M. The effect of Chlorella vulgaris supplementation on liver enzymes, serum glucose and lipid profile in patients with non-alcoholic fatty liver Health Promot. Perspect. 2014, 4, 107–115.
122. Azocar, J.; Diaz, A. Efficacy and safety of Chlorella supplementation in adults with chronic hepatitis C virus

infection. World J. Gastroenterol. 2013, 19, 1085–1090. [CrossRef]

123. Schecter, A.; Startin, J.; Wright, C.; Kelly, M.; Papke, O.; Lis, A.; Ball, M.; Olson, J.R. Dioxins in, U.S. food and estimated daily intake. Chemosphere 1994, 29, 2261–2265. [CrossRef]
124. Ven den Berg, M.; Jongh, J.; Poiger, H.; Olson, J.R. The toxicokinetics and metabolism of polychlorinated dibenzo-p-dioxins (PCDDs) and dibenzofurans (PCDFs) and their relevance for toxicity. Rev. Toxicol. 1994, 24, 1–74. [CrossRef] [PubMed]
125. Schecter, A.; Papke, O.; Lis, A.; Ball, M.; Ryan, J.J.; Olson, J.R.; Li, L.; Kessler, H. Decrease in milk and blood dioxin levels over two years in a mother nursing twins: Estimates of decreased maternal and increased infant dioxin body burden from nursing. Chemosphere 1996, 32, 543–549. [CrossRef]
126. Masuda, Y.; Kuroki, H.; Haraguchi, H.; Nagayama, J. PCB and PCDF congeners in the blood and tissues of Yusho and Yu-cheng patients. Health Perspect. 1985, 59, 53–58.
127. Morita, K.; Matsueda, T.; Iida, T.; Hasegawa, T. Chlorella accelerates dioxin excretion in rats. Nutr. 1999,

129, 1731–1736. [CrossRef] [PubMed]

128. Kinze, M.G.; Dolbere, F.A.; Carroll, K.L.; Moore, D.H., II; Felton, J.S. Effect of cooking time and temperature on the heterocyclic amine content of fried beef patties. Food Chem. Toxicol. 1994, 32, 595–603.
129. Lee, I.; Tran, M.; Evans-Nguyen, T.; Stickle, D.; Kim, S.; Han, J.; Park, J.Y.; Yang, M. Detoxification of chlorella supplement on heterocyclic amines in Korean young adults. Toxicol. Pharm. 2015, 39, 441–446. [CrossRef]
130. Harding, G.; Dalziel, J.; Vass, P. Bioaccumulation of methylmercury within the marine food web of the outer bay of Fundy, gulf of maine. PLoS ONE 2018, 13, e0197220. [CrossRef]
131. His, H.C.; Hsu, Y.W.; Chang, T.C.; Chien, L.C. Methylmercury concentration in fish and risk-benefit assessment of fish intake among pregnant versus infertile women in Taiwan. PLoS ONE 2016, 11, e0155704.
132. Uchikawa, T.; Yasutake, ; Kumamoto, Y.; Maruyama, I.; Kumamoto, S.; Ando, Y. The influence of Parachlorella beijerinckii CK-5 on the absorption and excretion of methylmercury (MeHg) in mice.
133. Toxicol. Sci. 2010, 35, 101–105. [CrossRef]
134. Maruyama, I.; Uchikawa, T.; Kanno, T.; Ando, Y.; Kitsuki, H.; Yasutake, A. Chlorella supplementation decreases methylmercury concentrations of hair and blood in healthy volunteers. Toxicol. Sci. 2018, 5, 117–122. [CrossRef]
135. Miettinen, J.K.; Rahola, T.; Hattula, T.; Rissanen, K.; Tillander, M. Elimination of 203Hg-methylmercury in

man. Ann. Clin. Res. 1971, 3, 116–122. [PubMed]

135. Ballatori, N.; Clarkson, T.W. Biliary transport of glutathione and methylmercury. J. Physiol 1983, 244, G435–G441. [CrossRef] [PubMed]
136. Fujiwara, Y.; Sinpo, K.; Imae, Y.; Nonomura, M.; Hirakawa, K. Effect of Chlorella vulgaris strain CK-5 on the

frequency of bowel movement in humans. Ipn. J. Nutr. 1998, 56, 253–263.

137. Nauta, A.; Engels, F.; Knippples, L.M.; Garssen, J.; Nijkamp, F.; Redegeld, F.A. Mechanisms of allergy and Eur. J. Pharmcol. 2008, 585, 354–360. [CrossRef] [PubMed]
138. Zhu, J.; Paul, W.E. CD4 T cells: Fates, functions, and faults. Blood 2008, 112, 1557–1569. [CrossRef] [PubMed]
139. Luckheeram, V.; Zhou, R.; Verma, A.D.; Xia, B. CD4+ cells: Differentiation and functions.

Clin. Dev. Immunol. 2012, 2012, 925135. [CrossRef]

140. Bancroft, G.J.; Schreiber, R.D.; Unanue, E.R. Natural immunity: A T-cell-independent pathway of macrophage activation, defined in the scid mouse. Rev. 1991, 124, 5–24. [CrossRef]
141. Wynn, T.A.; Jankovic, D.; Hieny, S.; Cheever, A.W.; Sher, A. IL-12 enhances vaccine induced immunity to Schistosomiasia mansoni in mice and decreases T helper 2 cytokine expression, IgE production, and tissue J. Immumol. 1995, 154, 4701–4709.
142. Galli, S.J.; Tsai, M. IgE and mast cells in allergic disease. Med. 2012, 18, 693–704. [CrossRef]
143. Hasegawa, T.; Ito, K.; Ueno, S.; Kumamoto, ; Ando, Y.; Yamada, A.; Nomoto, K.; Yasunobu, Y. Oral administration of hot water extracts of Chlorella vulgaris reduces IgE production against milk casein in mice. Int. J. Immunopharmacol. 1999, 21, 311–323. [CrossRef]
144. Hsu, H.Y.; Jeyashoke, N.; Yeh, C.H.; Song, Y.J.; Hua, K.F.; Chao, L.K. Immunostimulatory bioactivity of algal polysaccharides from Chlorella pyrenoidosa activates macrophages via Toll-like receptor 4. Agric. Food Chem. 2010, 58, 927–936. [CrossRef] [PubMed]
145. Eder, C. Mechanisms of interkeukin-1β Immnobiology 2009, 214, 543–553. [CrossRef] [PubMed]
146. Halperin, S.A.; Smith, B.; Nolan, C.; Shay, J.; Kralovec, J. Safety and immunoenhancing effect of a Chlorella-derived dietary supplement in healthy adults undergoing influenza vaccination: Randomized, double-bind, placebo-controlled trial. Med Assoc. J. 2003, 169, 111–117.
147. Lamm, M.E.; Nedrud, J.G.; Kaetzel, C.S.; Mazanec, M.B. IgA and mucosal defense. Acta Pathol. Microbiol. Scand. 1995, 103, 241–246. [CrossRef] [PubMed]
148. Otsuki, T.; Shimizu, K.; Iemitsu, M.; Kono, I. Salivary secretory immunoglobulin a secretion increases after 4-weeks ingestion of chlorella-derived multicomponent supplement in humans: A randomized cross over Nutr. J. 2011, 10, 91. [CrossRef] [PubMed]
149. Abel, A.M.; Yang, C.; Thakar, S.; Malarkannan, S. Natural killer cells: Development, maturation, and clinical utilization. Front. Immunol. 2018, 9, 1869. [CrossRef]
150. Kwak, J.H.; Baek, S.H.; Woo, Y.; Han, J.K.; Kim, B.G.; Kim, O.Y. Beneficial immunostimulatory effect of

short-term Chlorella supplementation: Enhancement of Natural Killer cell activity and early inflammatory response (randomized, double-blinded, placebo-controlled trial). Nutr. J. 2012, 11, 53. [CrossRef]

151. Konishi, F.; Tanaka, K.; Himeno, K.; Taniguchi, K.; Nomoto, K. Antitumor effect induced by a hot water extract

of Chlorella vultaris (CE): Resistance to Meth-A tumor growth mediated by CE-induced polymorphonuclear leukocytes. Cancer Immunol. Immunother. 1985, 19, 73–78. [CrossRef]

152. Tanaka, K.; Tomita, Y.; Tsuruta, M.; Konishi, F.; Okuda, M.; Himeno, K. Oral administration of Chlorella vulgaris augments concomitant antitumor immunity. Immunotoxicol. 1990, 12, 277–291. [CrossRef]
153. Wu, L.C.; Ho, J.A.; Shieh, M.C.; Lu, I.W. Antioxidant and antiproliferatives of Spirulina and Chlorella water J. Agric. Food Chem. 2005, 53, 4207–4212. [CrossRef]
154. Cha, K.H.; Koo, S.Y.; Lee, D.U. Antiproliferative effects of carotenoids extracted from Chlorella ellipsoidea

and Chlorella vulgaris on human colon cancer cells. J. Agric. Food Chem. 2008, 56, 10521–10526. [CrossRef] [PubMed]

155. Romos, A.L.; Torello, C.O.; Queiroz, M.L.S. Chlorella vulgaris modulates immunomyelopoietic activity and enhances the resistance of tumor-bearing mice. Cancer 2010, 62, 1170–1180. [CrossRef] [PubMed]
156. Noda, K.; Tanaka, K. A water-soluble glycoprotein from Chlorella vulgaris. Planta Med. 1996, 62, 423–426. [CrossRef] [PubMed]
157. Noda, K.; Ohno, N.; Tanaka, K. A new type of biological response modifier from Chlorella vulgaris which needs protein moiety to show antitumor activity. Res. 1998, 12, 309–319. [CrossRef]
158. Hasegawa, T.; Matsuguchi, T.; Noda, K.; Tanaka, K.; Kumamoto, S.; Shoyama, Y.; Yoshikai, Y. Toll-like receptor 2 is at least partly involved in the antitumor activity of glycoprotein from Chlorella vulgaris. Immunopharmacol. 2002, 2, 579–589. [CrossRef]
159. Selkoe, D.J. Alzheimer’s disease: Genes, proteins, and therapy. Rev. 2001, 81, 741–766. [CrossRef]
160. Bosman, G.J.; Barholomeus, I.G.; de Man, A.J.; van Kalmthout, P.J.; de Grip, W.J. Erythrocyte membrane characteristics indicate abnormal cellular aging in patients with Alzheimer’s disease. Aging. 1991, 12, 13–18. [CrossRef]
161. Nakagawa, K.; Kiko, T.; Hatade, K.; Asai, A.; Kumra, F.; Sookwong, P.; Tsuduki, T.; Arai, H.; Miyazawa, T. Development of a high-performance liquid chromatography-based assay for carotenoids in human red blood cells: Application to clinical studies. Biochem. 2008, 381, 129–134. [CrossRef]
162. Kiko, T.; Nakagawa, K.; Tsuduki, T.; Suzuki, T.; Arai, H.; Miyazawa, T. Significance of lutein in red blood cells of Alzheimer’s disease patients. Alzheimers Dis. 2012, 28, 593–600. [CrossRef]
163. Nakagawa, K.; Kiko, T.; Hatade, K.; Sookwong, P.; Arai, H.; Miyazawa, T. Antioxidant effect of lutein towards

phospholipid hydroperoxidation in human erythrocytes. Br. J. Nutr. 2009, 102, 1280–1284. [CrossRef]

164. Miyazawa, T.; Nakagawa, K.; Takekoshi, H.; Higuchi, O.; Koto, S.; Kondo, M.; Kimura, F.; Miyazawa, T. Ingestion of Chlorella reduced the oxidation of erythrocyte membrance lipids in senior Japanese subjects.
165. Oleo Sci. 2013, 62, 873–881. [CrossRef] [PubMed]
166. Andrade, L.; Caraveo-Anduaga, J.J.; Berglung, P.; Bijl, R.V.; de Graaf, R.; Vollebergh, W.; Dragomirecka, E.; Kohn, R.; Keller, M.; Kessler, R.; et al. The epidemiology of major depressive episodes: Results from the international consortium of psychiatric epidemiology (ICPE) surveys. J. Methods Psychiatry Res. 2003, 12, 3–21. [CrossRef] [PubMed]
167. Nemeroff, C.B. Prevalence and management of treatment-resistant depression. Clin. Psychiatry 2007, 68,

s17–s25.

167. Khawam, E.; Laurence, G.; Malone, J.R.D. Side effects of antidepressants: An overview. Cleve Clin. J. Med.

2006, 73, 351–353. [CrossRef]

168. Panahi, Y.; Badeli, R.; Karami, G.R.; Badeli, Z.; Sahebkar, A. A randomized controlled trial of 6-week Chlorella vulgaris supplementation in patients with major depressive disorder. Ther. Med. 2015, 23, 598–602. [CrossRef]
169. Halliwell, B. Oxidative stress and neurodegeneration: Where are we now? Neurochem. 2006, 97, 1634–1658. [CrossRef]
170. Valko, M.; Leibfritz, D.; Moncol, J.; Cronin, M.T.; Mazur, M.; Telser, J. Free radicals and antioxidants in normal physiological functions and human disease. J. Biochem. Cell Biol. 2007, 39, 44–84. [CrossRef]
171. Vijayavel, K.; Anbuselvam, C.; Balasubramanian, M.P. Antioxidant effect of the marine algae Chlorella

vulgaris against naphthalene-induced oxidative stress in the albino rats. Mol. Cell Biochem. 2007, 303, 39–44. [CrossRef]

172. Konishi, F.; Mitsuyama, M.; Okuda, M.; Tanaka, K.; Hasegawa, T.; Nomoto, K. Protective effect of an

acidic glycoprotein obtained from culture of Chlorella vulgaris against myelosuppression by 5-fluorouraci.

Cancer Immunol. Immunother. 1996, 42, 268–274. [CrossRef]

173. De Souza Queiroz, J.; Barbosa, C.M.V.; da Rocha, M.; Bincoletto, C.; Paredes-Gamero, E.J.; de Souza Queiroz, M.L.; Neto, J.P. Chlorella vulgaris treatment ameliorates the suppressive effects of single and repeated stressors on hematopoiesis. Brain Behav. Immun. 2013, 29, 39–50. [CrossRef]
174. Armario, A. The contribution of immediate early genes to the understanding of brain processing of stressors. In Immediate Early Genes in Sensory Processing Cognitive Performance and Neurological Disorders; Pinaud, R., Termere, L., Eds.; Springer: Berlin, Germany, 2006; pp. 199–221.
175. Queiroz, J.S.; Blasco, I.M.; Gagliano, H.; Daviu, N.; Román, A.G.; Belda, X.; Carrasco, J.; Rocha, M.C.; Neto, J.P.; Armario, A. Chlorella vulgaris reduces the impact of stress on hypothalamic-pituitary-adrenal axis and brain c-fos expression. Psychoneuroendocrinology 2016, 65, 1–8. [CrossRef] [PubMed]
176. Zheng, Y.; Inoue, Y.H.; Kohno, N.; Fujishima, M.; Okumura, E.; Sato, K. Phenethylamine in hot water extract of Chlorella pyrenoidosa expands lifespan of SOD1 mutant adults of Drosophila melanogaster at very low dose.
177. Food Bioact. 2020, 9, 52–57. [CrossRef]
178. Qiu, S.; Shen, Y.; Zhang, L.; Ma, B.; Amadu, A.A.; Ge, S. Antioxidant assessment of wastewater-cultivated

Chlorella sorokiniana in Drosophila melanogaster. Algal. Res. 2020, 46, 101795. [CrossRef]